Inledning.
Huvudmålet med denna forskning är att utvärdera möjligheten att bestämma de viktigaste läkemedlen i biologiska vätskor med allmänt tillgängliga uttryckliga metoder hemma. Den här artikeln svarar på följande frågor.
- Avslöjar apotekstest för $ 3-20 verkligen faktumet att använda de deklarerade ämnena? (Klassiska kombinerade testremsor innehåller skalor för bestämning av amfetamin, metamfetamin, kokain, marijuana, opiater).
- Kan dessa testremsor vara användbara för Alpha-PVP och Mephedrone? (Det finns inga specialiserade tester på apotek)
Anledningen till att använda det vanligaste apotekstestet, som är lätt att köpa, är en att forskningen ska vara till hjälp och har praktisk tillämpning.
Viktigt: andra laterala flödestester (LFT) kit med olika etiketter kan användas, ett tillverkningsföretag spelar ingen roll eftersom alla testkitremsor har samma arbetsmekanism och har jämförbar effektivitet.
Om LFT.
Laterala flödestester (LFT), även kända som laterala flödesimmunokromatografiska analyser eller snabbtester, är enkla anordningar avsedda att detektera närvaron av en målsubstans i ett flytande prov utan behov av specialiserad och kostsam utrustning. Dessa tester används ofta inom medicinsk diagnostik för hemtestning, vårdnära testning eller laboratorieanvändning. Ett graviditetstest för hemmabruk är till exempel en LFT som detekterar ett specifikt hormon. Dessa tester är enkla, ekonomiska och ger i allmänhet resultat på cirka fem till 30 minuter. Många laboratoriebaserade applikationer ökar känsligheten hos enkla LFT genom att använda ytterligare dedikerad utrustning.
LFT fungerar enligt samma principer som ELISA (enzyme-linked immunosorbent assays). I huvudsak innebär dessa tester att vätskeprovet förs över ytan på en pad med reaktiva molekyler som ger ett visuellt positivt eller negativt resultat. Kuddarna är baserade på en serie kapillärbäddar, t.ex. bitar av poröst papper, mikrostrukturerad polymer eller sintrad polymer. Var och en av dessa kuddar har kapacitet att transportera vätska (t.ex. urin, blod, saliv) spontant.
Provkudden fungerar som en svamp och rymmer ett överskott av provvätska. När vätskan är genomdränkt rinner den till den andra konjugatkudden, där tillverkaren har lagrat frystorkade bioaktiva partiklar, så kallade konjugat (se nedan), i en salt-sockermatris. Konjugatplattan innehåller alla de reagenser som krävs för en optimerad kemisk reaktion mellan målmolekylen (t.ex. ett antigen) och dess kemiska partner (t.ex. en antikropp) som har immobiliserats på partikelns yta. Dessa märken riktar in sig på partiklarna när de passerar genom dynan och fortsätter över till test- och kontrollinjerna. Testlinjen visar en signal, ofta en färg, som i graviditetstester. Kontrollinjen innehåller affinitetsligander som visar om provet har flödat igenom och om biomolekylerna i konjugatkudden är aktiva. Efter att ha passerat dessa reaktionszoner kommer vätskan in i det sista porösa materialet, veken, som helt enkelt fungerar som en avfallsbehållare.
LFT fungerar enligt samma principer som ELISA (enzyme-linked immunosorbent assays). I huvudsak innebär dessa tester att vätskeprovet förs över ytan på en pad med reaktiva molekyler som ger ett visuellt positivt eller negativt resultat. Kuddarna är baserade på en serie kapillärbäddar, t.ex. bitar av poröst papper, mikrostrukturerad polymer eller sintrad polymer. Var och en av dessa kuddar har kapacitet att transportera vätska (t.ex. urin, blod, saliv) spontant.
Provkudden fungerar som en svamp och rymmer ett överskott av provvätska. När vätskan är genomdränkt rinner den till den andra konjugatkudden, där tillverkaren har lagrat frystorkade bioaktiva partiklar, så kallade konjugat (se nedan), i en salt-sockermatris. Konjugatplattan innehåller alla de reagenser som krävs för en optimerad kemisk reaktion mellan målmolekylen (t.ex. ett antigen) och dess kemiska partner (t.ex. en antikropp) som har immobiliserats på partikelns yta. Dessa märken riktar in sig på partiklarna när de passerar genom dynan och fortsätter över till test- och kontrollinjerna. Testlinjen visar en signal, ofta en färg, som i graviditetstester. Kontrollinjen innehåller affinitetsligander som visar om provet har flödat igenom och om biomolekylerna i konjugatkudden är aktiva. Efter att ha passerat dessa reaktionszoner kommer vätskan in i det sista porösa materialet, veken, som helt enkelt fungerar som en avfallsbehållare.
Det finns två typer av LFT: direkt och konkurrerande metod.
Den direkta (sandwich) LFT använder ett antikropps-taggkonjugat som appliceras på ett konjugatmembran. Antikroppar som är specifika för denna analyt immobiliseras på testlinjen och antikroppar mot arter som är specifika för primära antikroppar immobiliseras på kontrollinjen. När provet, som innehåller ett analyserat ämne, appliceras på testremsan och detta prov träffar membranet med konjugatet, binds analyten till AT-tag-konjugatet. Därefter kommer immunkomplexet in i testzonen, där det binder till specifika antikroppar och bildar en "sandwich" av Ab-Ag-Ab-tag. Överskott av obundet konjugat binds till antikroppar mot arten på kontrollinjen. Därför är 2 linjer på testremsan ett positivt testresultat. Omdet inte finns något analyserat ämne i provet binder konjugatet till antikroppar mot arter endast på kontrollinjen och bildar en linje på testremsan. Den direkta LFT-metoden används för att detektera föreningar med hög molekylvikt - virus, inklusive HIV; olika hormoner (till exempel i graviditetstester), patogener av infektionssjukdomar.
Den kompetitiva LFT-metoden, som används för bestämning av föreningar med låg molekylvikt, baseras på konkurrensen mellan analyten och det immobiliserade konjugatet av analyt och bärarprotein om ett begränsat antal bindningsställen för specifika antikroppar som ingår i Ab-tag-konjugatet. När ett prov som innehåller analyten appliceras binds det till AT-tag-konjugatet på konjugatmembranet. Därefter passerar immunkomplexet genom testzonen, där analyten:bärarproteinkonjugatet är immobiliserat. Immunkomplexet kan inte binda till detta konjugat på grund av steriska hinder: föreningar med låg molekylvikt har vanligtvis en antigenisk determinant och följaktligen har antikroppar ett antigenbindningsställe, som redan är upptaget av analyten. Därefter binds immunkomplexet av antikroppar mot arten på kontrollinjen. Som ett resultat indikerar frånvaron av ett färgat band i testzonen och närvaron av en färg i kontrollzonen att koncentrationen av analyten i testprovet överstiger dess tröskelvärde för detta test.
Om det inte finns något analyserat i provet binder Ab-tag-konjugatet till Ag:carrier-proteinkonjugatet som immobiliserats i testlinjens zon. Obundet Ab-tag-konjugat kommer in i zonen för kontrollinjen och binds där med antikroppar mot olika arter. Förekomsten av två färgade linjer (test och kontroll) är således ett negativt analysresultat.
Det kompetitiva LFT-formatet används för att detektera föreningar med låg molekylvikt, inklusive metaboliter av narkotiska föreningar i urin, oral vätska och vävnadsextrakt.
Den kompetitiva LFT-metoden, som används för bestämning av föreningar med låg molekylvikt, baseras på konkurrensen mellan analyten och det immobiliserade konjugatet av analyt och bärarprotein om ett begränsat antal bindningsställen för specifika antikroppar som ingår i Ab-tag-konjugatet. När ett prov som innehåller analyten appliceras binds det till AT-tag-konjugatet på konjugatmembranet. Därefter passerar immunkomplexet genom testzonen, där analyten:bärarproteinkonjugatet är immobiliserat. Immunkomplexet kan inte binda till detta konjugat på grund av steriska hinder: föreningar med låg molekylvikt har vanligtvis en antigenisk determinant och följaktligen har antikroppar ett antigenbindningsställe, som redan är upptaget av analyten. Därefter binds immunkomplexet av antikroppar mot arten på kontrollinjen. Som ett resultat indikerar frånvaron av ett färgat band i testzonen och närvaron av en färg i kontrollzonen att koncentrationen av analyten i testprovet överstiger dess tröskelvärde för detta test.
Om det inte finns något analyserat i provet binder Ab-tag-konjugatet till Ag:carrier-proteinkonjugatet som immobiliserats i testlinjens zon. Obundet Ab-tag-konjugat kommer in i zonen för kontrollinjen och binds där med antikroppar mot olika arter. Förekomsten av två färgade linjer (test och kontroll) är således ett negativt analysresultat.
Det kompetitiva LFT-formatet används för att detektera föreningar med låg molekylvikt, inklusive metaboliter av narkotiska föreningar i urin, oral vätska och vävnadsextrakt.
Enklare förklaring.
Om du inte förstår kan jag förklara på ett enklare sätt. Det finns märkta antikroppar i början av varje testremsa. På grund av testremsans struktur sprids urin längs den och bär de resulterande komplexen in i testområdet, där läkemedelsproteinligamenten är fixerade. Eftersom antikroppen från det anlända immunkomplexet redan har tagits upp av läkemedlet från urinen, kan den inte fästa i testzonen och rör sig vidare till kontrollzonen, där den binder till antikroppen mot arten och färgar en remsa på skalan (positivt resultat).
Om det inte finns något läkemedel i bioprovet rör sig antikropparna i urinen längs testremsan och förblir fria. När antikropp-proteinkomplexet möts i testområdet fästs några märkta antikroppar på det (den första remsan visas), resten rör sig med urinflödet i kontrollområdet, där det också binder till antikroppen mot arten, vilket markerar den andra remsan (2 remsor - negativt resultat). Om linjen visas i testzonen men inte i kontrollzonen (ska alltid visas) - är testet felaktigt.
Om det inte finns något läkemedel i bioprovet rör sig antikropparna i urinen längs testremsan och förblir fria. När antikropp-proteinkomplexet möts i testområdet fästs några märkta antikroppar på det (den första remsan visas), resten rör sig med urinflödet i kontrollområdet, där det också binder till antikroppen mot arten, vilket markerar den andra remsan (2 remsor - negativt resultat). Om linjen visas i testzonen men inte i kontrollzonen (ska alltid visas) - är testet felaktigt.
Ämnena användes av volontärer som inte tog något psykoaktivt under en tillräcklig tidsperiod, urin togs för deras analys. Här är resultaten av experimentet.
Experiment.
AMFETAMINHuvudmetaboliter: amfetamin, 4-hydroxiamfetamin, 4-hydroxynorefedrin, 4-hydroxifenylaceton, bensoesyra, hippursyra, norefedrin, fenylaceton.
COCAINE.
Huvudmetaboliter: benzoylecgonin, ecgoninmetylester, ecgonin, norcocaine, p-hydroxycaine, m-hydroxycaine, p-hydroxybenzoylecgonin, m-hydroxybenzoylecgonin.
Om du tittar på testet till höger kan du se varför testremsorna måste hanteras med en kritisk synvinkel. Den testade personen har inte nyligen använt någon PAS, förutom kokain.
HEROIN.
Huvudmetaboliter: morfin, normorfin, hydromorfon.
MDMA / ECSTASY.
Huvudmetaboliter: 3,4-metylendioximetamfetamin (MDMA), 3,4-metylendioximetamfetamin (MDA), 4-hydroxi-3-metoximetamfetamin (HMMA), 4-hydroxi-3-metoximetamfetamin (HMA).
Det finns MDMA / Ecstasy-testremsor tillgängliga, men de är svårare att hitta. Amfetamin och metamfetamin hittades i urinen. Detta förklaras av deras gemensamma tillhörighet till samma klass och följaktligen av den strukturella likheten hos ämnen och deras metaboliter. THC (cannabinoider) och OPI (opiater) skalor på det andra testet deltar inte i experimentet (inte aktiverat). Enligt det vänstra fotot detekteras inte dessa ämnen i samband med användning av MDMA.
MEPHEDRONE.
Större metaboliter: mefedron, nor-mefedron, 4'-karboxy-mefedron, 1'-dihydro-mefedron, N-succinyl-nor-mefedron.
En intressant kommentar från redaktörerna på webbplatsen https://www.zoomtesting.co.uk, "Vissa leverantörer påpekar att ett metamfetamintest kan användas för att upptäcka mefedron. Detta är dock felaktigt. Den kemiska strukturen hos meth och meph är annorlunda, så metamfetamintestet kommer inte att vara giltigt för mephedron". Tja, låt oss kolla in det.
Förutom standardsubstanser användes ytterligare en testremsa för att testa för barbiturater. Det är helt klart något fel med denna testremsa. Testet upprepades av en annan frivillig som aldrig hade använt barbiturater eller preparat som innehåller dem, med ett liknande resultat.
ALPHA-PVP (alfa-pyrrolidinovalerofenon).
Den andra raden i PCP-fönstret är nästan helt frånvarande.
MARIJUANA.
Större metaboliter: tetrahydrocannabinol (THC), 11-hydroxy-THC, 11-nor-9-karboxy-THC. Cannabis väl bestämd och alltid bara i sitt fönster "THC" (tetrahydrocannabinol), det räcker att visa på det enklaste testet.
Slutsats.
Tester har detekterat droger i kroppsvätskor mycket längre än dess psykoaktiva effekt känns. De är ganska billiga, har god känslighet och är bara marginellt sämre än de metoder som används i laboratoriet. Kom ihåg din säkerhet - om det finns ett behov av att kontrollera din "renlighet" själv, kommer expresstester att vara oumbärliga.
Last edited by a moderator: