Uvod: V tem priročniku so predstavljeni naslednji primeri kemijskih kemikalij, ki jih je treba obravnavati v okviru kemijske zakonodaje.
Glavni cilj te raziskave je ocena možnosti določanja glavnih zdravil v bioloških tekočinah z javno dostopnimi ekspresnimi metodami doma. Ta članek odgovarja na naslednja vprašanja.
- Ali lekarniški test za 3-20 dolarjev res razkrije dejstvo uporabe deklariranih snovi? (Klasični kombinirani testni trakovi vsebujejo lestvice za določanje amfetamina, metamfetamina, kokaina, marihuane in opiatov).
- Ali so ti testni trakovi lahko uporabni za alfa-PVP in mefedron? (V lekarnah ni specializiranih testov)
Razlog za uporabo najpogostejših testov v lekarnah, ki jih je enostavno kupiti, je v tem, da bi morala biti raziskava koristna in imeti praktično uporabo.
Pomembno: lahko se uporabijo drugi kompleti za teste lateralnega pretoka (LFT) z različnimi oznakami, podjetje proizvajalec ni pomembno, saj imajo vsi testni trakovi enak mehanizem delovanja in so primerljivo učinkoviti.
O LFT.
Testi s stranskim tokom (LFT), znani tudi kot imunokromatografski testi s stranskim tokom ali hitri testi, so preproste naprave, namenjene odkrivanju prisotnosti ciljne snovi v tekočem vzorcu brez potrebe po specializirani in dragi opremi. Ti testi se pogosto uporabljajo v medicinski diagnostiki za domače testiranje, testiranje na mestu oskrbe ali laboratorijsko uporabo. Domači test za ugotavljanje nosečnosti je na primer test za ugotavljanje nosečnosti, ki zazna določen hormon. Ti testi so preprosti, ekonomični in običajno pokažejo rezultate v približno petih do 30 minutah. Številne laboratorijske aplikacije povečajo občutljivost preprostih LFT z uporabo dodatne namenske opreme.
LFT delujejo po enakih načelih kot encimski imunosorbcijski testi (ELISA). Pri teh testih tekoči vzorec teče po površini blazinice z reaktivnimi molekulami, ki pokažejo vizualno pozitiven ali negativen rezultat. Blazinice temeljijo na nizu kapilarnih plasti, kot so kosi poroznega papirja, mikrostrukturiranega polimera ali sintranega polimera. Vsaka od teh blazinic ima sposobnost spontanega prenosa tekočine (npr. urina, krvi, sline).
Vzorčna blazinica deluje kot goba in zadrži presežek vzorčne tekočine. Ko se tekočina prepoji, steče do druge konjugirane blazinice, v katero je proizvajalec shranil liofilizirane bioaktivne delce, imenovane konjugati (glej spodaj), v matrici iz soli in sladkorja. Konjugatna blazinica vsebuje vse reagente, potrebne za optimalno kemijsko reakcijo med ciljno molekulo (npr. antigenom) in njenim kemijskim partnerjem (npr. protitelesom), ki je bil imobiliziran na površini delca. Te oznake označujejo ciljne delce, ko ti prehajajo skozi blazinico in nadaljujejo pot do testnih in kontrolnih linij. Na testni liniji se pokaže signal, pogosto barvni, kot pri testih za ugotavljanje nosečnosti. Kontrolna linija vsebuje afinitetne ligande, ki pokažejo, ali je vzorec stekel skozi in ali so biološke molekule v konjugirani blazinici aktivne. Po prehodu teh reakcijskih območij tekočina vstopi v končni porozni material, knot, ki preprosto deluje kot posoda za odpadke.
LFT delujejo po enakih načelih kot encimski imunosorbcijski testi (ELISA). Pri teh testih tekoči vzorec teče po površini blazinice z reaktivnimi molekulami, ki pokažejo vizualno pozitiven ali negativen rezultat. Blazinice temeljijo na nizu kapilarnih plasti, kot so kosi poroznega papirja, mikrostrukturiranega polimera ali sintranega polimera. Vsaka od teh blazinic ima sposobnost spontanega prenosa tekočine (npr. urina, krvi, sline).
Vzorčna blazinica deluje kot goba in zadrži presežek vzorčne tekočine. Ko se tekočina prepoji, steče do druge konjugirane blazinice, v katero je proizvajalec shranil liofilizirane bioaktivne delce, imenovane konjugati (glej spodaj), v matrici iz soli in sladkorja. Konjugatna blazinica vsebuje vse reagente, potrebne za optimalno kemijsko reakcijo med ciljno molekulo (npr. antigenom) in njenim kemijskim partnerjem (npr. protitelesom), ki je bil imobiliziran na površini delca. Te oznake označujejo ciljne delce, ko ti prehajajo skozi blazinico in nadaljujejo pot do testnih in kontrolnih linij. Na testni liniji se pokaže signal, pogosto barvni, kot pri testih za ugotavljanje nosečnosti. Kontrolna linija vsebuje afinitetne ligande, ki pokažejo, ali je vzorec stekel skozi in ali so biološke molekule v konjugirani blazinici aktivne. Po prehodu teh reakcijskih območij tekočina vstopi v končni porozni material, knot, ki preprosto deluje kot posoda za odpadke.
Obstajata dve vrsti LFT: neposredna in konkurenčna metoda.
Pri neposredni (sendvič) LFT se uporablja konjugat protitelesa in oznake, ki se nanese na konjugirano membrano. Protitelesa, specifična za ta analit, so imobilizirana na testni liniji, protitelesa, specifična za primarna protitelesa, pa so imobilizirana na kontrolni liniji. Ko se vzorec, ki vsebuje analizirano snov, nanese na testno črto in ta vzorec naleti na membrano s konjugatom, se analit veže na konjugat AT-tag. Nato imunski kompleks vstopi v testno območje, kjer se veže na specifična protitelesa in tvori "sendvič" Ab-Ag-Ab-tag. Presežek nevezanega konjugata se veže na protitelesa proti vrsti na kontrolni črti. Zato 2 črtici na testnem traku pomenita pozitiven rezultat testa. Če v vzorcuni analizirane snovi, se konjugat veže s protitelesi proti vrstam samo na kontrolni črtici, kar tvori eno črto na testnem traku. Neposredna metoda LFT se uporablja za odkrivanje visokomolekularnih spojin - virusov, vključno z virusom HIV; različnih hormonov (na primer pri testih nosečnosti), povzročiteljev nalezljivih bolezni.
Konkurenčna metodaLFT, ki se uporablja za določanje nizkomolekularnih spojin, temelji na tekmovanju med analitom in imobiliziranim konjugatom analit:nosilni protein za omejeno število vezavnih mest za specifična protitelesa, ki jih vsebuje konjugat Ab-tag. Ko se uporabi vzorec, ki vsebuje analit, se ta veže na konjugatni membrani na konjugatni konjugat AT-tag. Nato imunski kompleks preide skozi testno območje, kjer je imobiliziran konjugat analit:nosilni protein. Imunokompleks se ne more vezati na ta konjugat zaradi steričnih ovir: nizkomolekularne spojine imajo običajno eno antigensko determinanto, zato imajo protitelesa eno antigensko vezavno mesto, ki je že zasedeno z analitom. Nato se imunski kompleks veže s protitelesi proti vrsti na kontrolni liniji. Posledično odsotnost obarvanega traku na testnem območju in prisotnost barve na kontrolnem območju pomeni, da koncentracija analita v testnem vzorcu presega mejno vrednost za ta test.
Če v vzorcu ni analizirane snovi, se konjugat Ab-oznaka veže na konjugat Ag:nosilni protein, imobiliziran v območju testne linije. Nevezan konjugat Ab-tag vstopi v območje kontrolne linije in se tam veže s protitelesi proti vrsti. Tako je prisotnost dveh obarvanih črt (testne in kontrolne) negativen rezultat analize.
Konkurenčna oblika LFT se uporablja za odkrivanje nizkomolekularnih spojin, vključno z metaboliti narkotičnih spojin v urinu, ustni tekočini in tkivnih ekstraktih.
Konkurenčna metodaLFT, ki se uporablja za določanje nizkomolekularnih spojin, temelji na tekmovanju med analitom in imobiliziranim konjugatom analit:nosilni protein za omejeno število vezavnih mest za specifična protitelesa, ki jih vsebuje konjugat Ab-tag. Ko se uporabi vzorec, ki vsebuje analit, se ta veže na konjugatni membrani na konjugatni konjugat AT-tag. Nato imunski kompleks preide skozi testno območje, kjer je imobiliziran konjugat analit:nosilni protein. Imunokompleks se ne more vezati na ta konjugat zaradi steričnih ovir: nizkomolekularne spojine imajo običajno eno antigensko determinanto, zato imajo protitelesa eno antigensko vezavno mesto, ki je že zasedeno z analitom. Nato se imunski kompleks veže s protitelesi proti vrsti na kontrolni liniji. Posledično odsotnost obarvanega traku na testnem območju in prisotnost barve na kontrolnem območju pomeni, da koncentracija analita v testnem vzorcu presega mejno vrednost za ta test.
Če v vzorcu ni analizirane snovi, se konjugat Ab-oznaka veže na konjugat Ag:nosilni protein, imobiliziran v območju testne linije. Nevezan konjugat Ab-tag vstopi v območje kontrolne linije in se tam veže s protitelesi proti vrsti. Tako je prisotnost dveh obarvanih črt (testne in kontrolne) negativen rezultat analize.
Konkurenčna oblika LFT se uporablja za odkrivanje nizkomolekularnih spojin, vključno z metaboliti narkotičnih spojin v urinu, ustni tekočini in tkivnih ekstraktih.
Preprostejša razlaga.
Če ne razumete, vam bom razložil na preprostejši način. Na začetku vsakega testnega traku so označena protitelesa. Zaradi strukture testnega traku se urin širi vzdolž njega in nastale komplekse prenaša v testno območje, kjer so fiksirane vezi med drogami in beljakovinami. Ker je protitelo iz prispelega imunskega kompleksa že prevzelo zdravilo iz urina, se na testnem območju ne more pritrditi in se premakne naprej v kontrolno območje, kjer se poveže s protitelesom proti vrsti in obarva en trak na lestvici (pozitiven rezultat).
Če v biološkem vzorcu ni droge, se protitelesa premikajo v urinu po testnem traku in ostanejo prosta. Ko se kompleks protitelesa-beljakovina sreča v testnem območju, se nanj pritrdi nekaj označenih protiteles (pojavi se prvi trakec), preostanek pa se s tokom urina premika v kontrolno območje, kjer se prav tako veže na protitelo proti vrsti, kar obarva drugi trakec (dva trakova - negativen rezultat). Če se črta pojavi v testnem območju, ne pojavi pa se v kontrolnem območju (vedno bi se morala pojaviti), je test napačen.
Če v biološkem vzorcu ni droge, se protitelesa premikajo v urinu po testnem traku in ostanejo prosta. Ko se kompleks protitelesa-beljakovina sreča v testnem območju, se nanj pritrdi nekaj označenih protiteles (pojavi se prvi trakec), preostanek pa se s tokom urina premika v kontrolno območje, kjer se prav tako veže na protitelo proti vrsti, kar obarva drugi trakec (dva trakova - negativen rezultat). Če se črta pojavi v testnem območju, ne pojavi pa se v kontrolnem območju (vedno bi se morala pojaviti), je test napačen.
Snovi so uporabljali prostovoljci, ki dovolj dolgo niso jemali nič psihoaktivnega, za njihovo analizo je bil odvzet urin. Tukaj so rezultati poskusa.
Poskusi.
AMFETAMINGlavni metaboliti: amfetamin, 4-hidroksiamfetamin, 4-hidroksinorefedrin, 4-hidroksifenilaceton, benzojeva kislina, hipurinska kislina, norefedrin, fenilaceton.
KOKAIN.
Glavni metaboliti: benzoilekgonin, metil ester ekgonina, ekgonin, norkokain, p-hidroksikain, m-hidroksikain, p-hidroksibenzoilekgonin, m-hidroksibenzoilekgonin.
Če si ogledate test na desni strani, lahko vidite, zakaj je treba testne trakove obravnavati s kritičnega vidika. Testirana oseba v zadnjem času ni uporabljala PAS, razen kokaina.
HEROIN.
Glavni metaboliti: morfin, normorfin, hidromorfon.
MDMA / EKSTAZI.
Glavni metaboliti: 3,4-metilendioksimetamfetamin (MDMA), 3,4-metilendioksiamfetamin (MDA), 4-hidroksi-3-metoksimetamfetamin (HMMA), 4-hidroksi-3-metoksiamfetamin (HMA).
Na voljo so testni trakovi za MDMA/ekstazi, vendar jih je težje najti. V urinu so našli amfetamin in metamfetamin. To je mogoče razložiti z njuno skupno pripadnostjo istemu razredu in v skladu s tem s strukturno podobnostjo snovi in njunih presnovkov. Tehtnici THC (kanabinoidi) in OPI (opiati) pri drugem testu ne sodelujeta v poskusu (nista aktivirani). Glede na levo fotografijo teh snovi ne odkrijemo v povezavi z uporabo MDMA.
MEFEDRON.
Glavni metaboliti: mefedron, nor-mefedron, 4'-karboxy-mefedron, 1'-dihidro-mefedron, N-sucinil-nor-mefedron.
Zanimiv komentar urednikov spletne strani https://www.zoomtesting.co.uk:"Nekateri prodajalci poudarjajo, da je mogoče za odkrivanje mefedrona uporabiti metamfetaminski test. Vendar je to napačno. Kemična struktura metamfetamina in mefedrona je različna, zato metamfetaminski test ne bo veljaven za mefedron". No, preverimo to.
Poleg standardnih snovi je bil za testiranje barbituratov uporabljen še en testni trak. S tem testnim trakom je očitno nekaj narobe. Test je ponovil še en prostovoljec, ki ni nikoli uporabljal barbituratov ali pripravkov, ki jih vsebujejo, s podobnim rezultatom.
ALFA-PVP (alfa-pirolidinovalerofenon).
Druga vrstica v oknu PCP je skoraj popolnoma odsotna.
MARIJUANA.
Glavni metaboliti: tetrahidrokanabinol (THC), 11-hidroksi-THC, 11-nor-9-karboxy-THC. Konoplja dobro določena in vedno le v svojem okencu "THC" (tetrahidrokanabinol), je dovolj, da se dokaže na najpreprostejšem testu.
Zaključek.
S testi se droge v telesnih tekočinah odkrivajo že veliko dlje, kot se občuti njihov psihoaktivni učinek. So dokaj poceni, imajo dobro občutljivost in so le malo slabši od metod, ki se uporabljajo v laboratoriju. Ne pozabite na svojo varnost - če bo treba sami preveriti svojo "čistost", bodo ekspresni testi nepogrešljivi.
Last edited by a moderator: