AM-2201 (1-(5-фторпентил)-[1H-индол-3-ил]-(нафталин-1-ил)-метанон - синтетический каннабиноид, который был первоначально создан в 2000 году как фармакологический инструмент для изучения эндоканнабиноидной системы. Это мощный полный агонист каннабиноидных рецепторов (CB1R), который вызывает психоактивные эффекты, сходные с эффектами фитоканнабиноида Δ9-тетрагидроканнабинола (ТГК), но его аффинность связывания в 40 раз выше, чем у ТГК. Аналогично, аффинность связывания АМ-2201 с каннабиноидными рецепторами 2-го типа (CB2R), отвечающими за каннабиноидно-опосредованные периферические эффекты, в 14 раз выше, чем у ТГК. Наиболее распространенным способом введения является курение, а типичные дозы АМ-2201 составляют от 250 мкг до 2 мг. Как правило, АМ-2201 входит в состав следующих веществ: 'Spice', 'K2', 'легальная трава', 'синтетический каннабис', 'травяные благовония'. Кроме того, в Германии он был обнаружен в качестве добавки к более чем 90 различным маркам "травяных смесей", среди которых: Agent Orange", "Atomic Bomb", "Green", "Jamaican Gold Extreme", "Manga Xtreme", "New Bonzai" и "XoXo". Сеть предупреждения злоупотребления наркотиками (DAWN) сообщает о 15 тысячах обращений в отделение неотложной помощи, связанных со злоупотреблением синтетическими каннабиноидами. Метаболиты AM-2201 были обнаружены примерно в 60 % образцов крови. При нагревании (например, во время курения) AM-2201 может в незначительной степени превращаться в JWH-018. JWH-018 был одним из первых синтетических каннабиноидов, включенных в различные национальные законодательства по контролю над наркотиками. Однако АМ-2201 не считается прямым прекурсором какого-либо вещества, контролируемого на международном уровне. АМ-2201 представляет собой нафтоилиндол, алкилированный по индольному азоту и несущий атом фтора в 5-положении пентильной боковой цепи. С точки зрения базовой химии его можно считать относительно инертным, поскольку он замещен нафтоилиндольным мотивом в рекреационном положении C-3. Благодаря ароматичности индольной системы, азот не приводит к увеличению "основности". В отличие от нефторированных аналогов, при повышенных температурах в незначительной степени может превращаться в JWH-018 и JWH-022. Аналитический профиль этого вещества описан в различных работах, а используемые методы включают ЖХ-МС/МС, ГХ-ЭИ-МС, ЖХ-Q-ToF-МС, AccuTOF-DART, ЯМР, FTIR ATR и UV-VIS детекцию. Он может быть обнаружен в сыворотке, цельной крови, волосах, ротовой жидкости, в образцах мочи главной аналитической целью являются его основные метаболиты.
Само вещество имеет вид белого кристаллического твердого вещества (в чистом виде), растворимого в этаноле (5 мг/мл). Имеет молекулярную формулу C24H22FNO, молекулярную массу 359,43 г/моль, температуру плавления 93,7 °C. Температура кипения вещества не определена. Синтез АМ-2201 был впервые описан в 2001 году Александросом Макрияннисом и Хонгфенг Денгом. Он начинается с растворения 1-H-индола в этиловом эфире уксусной кислоты, затем добавляется раствор метилмагнийбромида в этиловом эфире уксусной кислоты. Затем добавляют нафталин-1-карбонилхлорид (полученный из нафталин-1-карбоновой кислоты и тионилхлорида), и, наконец, водный раствор хлорида аммония. Затем полученный фильтрат 1H-индол-3-ил(нафталин-1-ил)метанона промывают и перекристаллизовывают. Этот продукт добавляют к суспензии гидрида натрия в диметилформамиде (DMF), затем добавляют 5-бромпентилацетат для N-алкилирования. После расщепления ацетата метанольным раствором гидроксида калия проводят фторирование пентильной боковой цепи с помощью диэтиламиносульфаттрифторида (DAST) и дихлорметана.
Фармакокинетика и фармакодинамика АМ-2201.
АМ-2201 метаболизируется различными ферментами семейства CYP450. В исследованиях на микросомах печени человека (HLM) и на рекомбинантном человеческом белке было установлено, что CYP2C9 и CYP1A2 являются основными ферментами, участвующими в окислении АМ-2201, в то время как CYP2C19, 2D6, 2E1 и 3A4 играют незначительную роль на этом этапе метаболизма. В дополнение к метаболическим реакциям АМ-2201 подвергается ферментативному дефторированию, которое, предположительно, происходит в присутствии цитохрома Р450 2Е1. Также выявлено, что CYP1A2, 2C9 и 2C19 опосредуют окислительное дефторирование. В исследованиях in vitro и in vivo было выявлено различие между JWH-018 и А-2201. Так, N-(4OH-пентил) JWH-018 образуется исключительно после абсорбции JWH-018, поэтому он может быть использован в качестве диагностического маркера для дифференциации абсорбции JWH-018 и АМ-2201. К основным метаболитам относятся: AM-2201 N-(4-OH-пентил), AM-2201 6-OH-индол, JWH-018 N-(5-OH-пентил), JWH-018 пентаноиновая кислота, JWH-073 N-(4- OH-бутил) и JWH-073 бутаноиновая кислота. Конъюгация с глюкуроновой кислотой осуществляется различными UDP-глюкуронозилтрансферазами, преимущественно печеночными (UGT1A1, UGT1A9 и UGT2B7) и ферментами, включая: JWH-018 N-(5-OH-пентил), JWH-018 пентаноиновая кислота, JWH-073 N-(4-OH-бутил), а также JWH-073 бутаноиновая кислота.
Что касается фармакологических констант, то после приема 5 мг АМ-2201 пиковая концентрация в сыворотке крови с показателем 0,56 н/мл обнаруживается через 1 час 35 минут, и продолжает обнаруживаться в сыворотке крови в течение последующих пяти дней (с пределом обнаружения 0,8 пг/мл). Этот факт свидетельствует о периоде полураспада в несколько дней. В исследованиях Карлье по метаболизму АМ-2201 на крысах были определены профили временной концентрации в плазме крови, которые существенно зависели от дозы и времени, при этом концентрация линейно увеличивалась по мере увеличения дозы. Так, после введения АМ-2201 в дозе 0,3 мг/кг концентрация была значительно выше, чем после введения 0,1 мг/кг, при этом она обнаруживалась в плазме даже через 4 часа с показателем 3,22 мкг/л. Максимальное время достижения максимальной концентрации составило 1,3 часа, и оно не зависело от введенной дозы. Однако период полувыведения зависел от принятой дозы. Время достижения максимальной концентрации метаболита WH-018 N-(5-гидроксипентил) составило 2 часа, и метаболит можно было обнаружить даже через 24 часа. В 2013 году компания Hutter сообщила о первом фармакокинетическом исследовании АМ-2201 на людях, основанном на однократном приеме вещества в дозе 0,07 мг/кг. В их исследовании концентрация AM-2201 в плазме крови снижалась до 0,6-0,02 мкг/л (LOQ) через 1,5-125 часов после приема. В сыворотке крови было обнаружено только 4 метаболита: JWH-018 N-пентаноевая кислота, JWH-018 N-(5-гидроксипентил), AM-2201 6'-гидроксииндол и AM-2201 N-(4-гидроксипентил). Важно отметить, что сывороточные концентрации JWH-018 N-пентаноиновой кислоты превышали концентрации АМ-2201 во всех образцах. Максимальные концентрации JWH-018 N-(5-гидроксипентил) и JWH-018 N-пентаноевой кислоты были зарегистрированы через 1,5 и 4,1 часа после введения вещества, соответственно. JWH-018 N-пентаноиновая кислота обнаруживалась до 57 часов после приема. Разные показатели у крыс и человека, предположительно, являются результатом межвидовых различий и различий в способах введения. Так, после перорального приема АМ-2201 желудочно-кишечный метаболизм был более значимым, чем sc-путь, который является обходным для данного метаболического пути. Концентрация АМ-2201 в крови у человека не превышала 5 мкг/л.
Данные о фармакодинамике вещества in vivo пока не выявлены. Однако известно, что он обладает высокой аффинностью связывания с каннабиноидными рецепторами первого типа, выражающейся в IC50 (захват 50% рецепторов) - 1,0 нМ и с каннабиноидными рецепторами второго типа - 2,6 нМ, по сравнению с аффинностью дельта-9-тетрагидроканнабинола (ТГК) - 40,7 нМ для CB1- и 36,4 нМ для CB2-рецепторов. Более того, в исследованиях in vitro с анализом связывания [35S] гуанозин-5'-O-(3-тио)-трифосфата ([35S]GTPγS) 50% эффективная концентрация (EC50) определена в 0,24 нМ при полных агонистических свойствах вещества в отношении рецепторов. Основываясь на этих данных и клинических наблюдениях, можно предположить, что АМ-2201 проявляет типичные эффекты CB1-агонистов. Эти эффекты могут включать седацию, когнитивную дисфункцию, тахикардию, постуральную гипотензию, сухость во рту, атаксию, иммуносупрессию и психотропные эффекты. Выраженным отличием от ТГК является образование под действием АМ-2201 потенциально фармакологически активных метаболитов. В то время как в случае ТГК психоактивными свойствами обладает только один из основных метаболитов, который сохраняет сродство к каннабиноидным рецепторам (11-OH-THC: Ki на CB1-рецепторе: 38,4 ± 0,8 нМ). Пара метаболитов AM-2201 сохраняет высокую аффинность связывания с CB1-рецепторами с относительным рейтингом связывания AM-2201 > AM-2201 N-(4-OH-пентил) = JWH-018 N-(5-OH-пентил) > THC > JWH-073 N-(4-OH-бутил). Глюкоронидированный метаболит JWH-018 N-(5-OH-пентил) сохраняет сродство к рецептору CB1 и активность в качестве нейтрального антагониста (Ki: 922 нМ). Нет данных о том, способен ли этот метаболит антагонизировать фармакологические эффекты JWH-018 in vivo, и образуются ли достаточные концентрации в месте действия.
Клинические эффекты, дозы и токсичность АМ-2201.
Применение вещества людьми с психическими заболеваниями категорически запрещено. Что касается потенциальной зависимости, то психическая зависимость от вещества возникает исключительно при длительном многократном применении. Имеются данные о возможности возникновения абстинентного синдрома, который характеризуется искаженным настроением, тремором конечностей, повышенной тревожностью, субдепрессивным состоянием, спонтанным учащением сердцебиения и паническими атаками, причем вышеперечисленные симптомы нивелируются в течение 2-3 месяцев воздержания от употребления без фармакологической терапии.Само вещество имеет вид белого кристаллического твердого вещества (в чистом виде), растворимого в этаноле (5 мг/мл). Имеет молекулярную формулу C24H22FNO, молекулярную массу 359,43 г/моль, температуру плавления 93,7 °C. Температура кипения вещества не определена. Синтез АМ-2201 был впервые описан в 2001 году Александросом Макрияннисом и Хонгфенг Денгом. Он начинается с растворения 1-H-индола в этиловом эфире уксусной кислоты, затем добавляется раствор метилмагнийбромида в этиловом эфире уксусной кислоты. Затем добавляют нафталин-1-карбонилхлорид (полученный из нафталин-1-карбоновой кислоты и тионилхлорида), и, наконец, водный раствор хлорида аммония. Затем полученный фильтрат 1H-индол-3-ил(нафталин-1-ил)метанона промывают и перекристаллизовывают. Этот продукт добавляют к суспензии гидрида натрия в диметилформамиде (DMF), затем добавляют 5-бромпентилацетат для N-алкилирования. После расщепления ацетата метанольным раствором гидроксида калия проводят фторирование пентильной боковой цепи с помощью диэтиламиносульфаттрифторида (DAST) и дихлорметана.
Фармакокинетика и фармакодинамика АМ-2201.
АМ-2201 метаболизируется различными ферментами семейства CYP450. В исследованиях на микросомах печени человека (HLM) и на рекомбинантном человеческом белке было установлено, что CYP2C9 и CYP1A2 являются основными ферментами, участвующими в окислении АМ-2201, в то время как CYP2C19, 2D6, 2E1 и 3A4 играют незначительную роль на этом этапе метаболизма. В дополнение к метаболическим реакциям АМ-2201 подвергается ферментативному дефторированию, которое, предположительно, происходит в присутствии цитохрома Р450 2Е1. Также выявлено, что CYP1A2, 2C9 и 2C19 опосредуют окислительное дефторирование. В исследованиях in vitro и in vivo было выявлено различие между JWH-018 и А-2201. Так, N-(4OH-пентил) JWH-018 образуется исключительно после абсорбции JWH-018, поэтому он может быть использован в качестве диагностического маркера для дифференциации абсорбции JWH-018 и АМ-2201. К основным метаболитам относятся: AM-2201 N-(4-OH-пентил), AM-2201 6-OH-индол, JWH-018 N-(5-OH-пентил), JWH-018 пентаноиновая кислота, JWH-073 N-(4- OH-бутил) и JWH-073 бутаноиновая кислота. Конъюгация с глюкуроновой кислотой осуществляется различными UDP-глюкуронозилтрансферазами, преимущественно печеночными (UGT1A1, UGT1A9 и UGT2B7) и ферментами, включая: JWH-018 N-(5-OH-пентил), JWH-018 пентаноиновая кислота, JWH-073 N-(4-OH-бутил), а также JWH-073 бутаноиновая кислота.
Что касается фармакологических констант, то после приема 5 мг АМ-2201 пиковая концентрация в сыворотке крови с показателем 0,56 н/мл обнаруживается через 1 час 35 минут, и продолжает обнаруживаться в сыворотке крови в течение последующих пяти дней (с пределом обнаружения 0,8 пг/мл). Этот факт свидетельствует о периоде полураспада в несколько дней. В исследованиях Карлье по метаболизму АМ-2201 на крысах были определены профили временной концентрации в плазме крови, которые существенно зависели от дозы и времени, при этом концентрация линейно увеличивалась по мере увеличения дозы. Так, после введения АМ-2201 в дозе 0,3 мг/кг концентрация была значительно выше, чем после введения 0,1 мг/кг, при этом она обнаруживалась в плазме даже через 4 часа с показателем 3,22 мкг/л. Максимальное время достижения максимальной концентрации составило 1,3 часа, и оно не зависело от введенной дозы. Однако период полувыведения зависел от принятой дозы. Время достижения максимальной концентрации метаболита WH-018 N-(5-гидроксипентил) составило 2 часа, и метаболит можно было обнаружить даже через 24 часа. В 2013 году компания Hutter сообщила о первом фармакокинетическом исследовании АМ-2201 на людях, основанном на однократном приеме вещества в дозе 0,07 мг/кг. В их исследовании концентрация AM-2201 в плазме крови снижалась до 0,6-0,02 мкг/л (LOQ) через 1,5-125 часов после приема. В сыворотке крови было обнаружено только 4 метаболита: JWH-018 N-пентаноевая кислота, JWH-018 N-(5-гидроксипентил), AM-2201 6'-гидроксииндол и AM-2201 N-(4-гидроксипентил). Важно отметить, что сывороточные концентрации JWH-018 N-пентаноиновой кислоты превышали концентрации АМ-2201 во всех образцах. Максимальные концентрации JWH-018 N-(5-гидроксипентил) и JWH-018 N-пентаноевой кислоты были зарегистрированы через 1,5 и 4,1 часа после введения вещества, соответственно. JWH-018 N-пентаноиновая кислота обнаруживалась до 57 часов после приема. Разные показатели у крыс и человека, предположительно, являются результатом межвидовых различий и различий в способах введения. Так, после перорального приема АМ-2201 желудочно-кишечный метаболизм был более значимым, чем sc-путь, который является обходным для данного метаболического пути. Концентрация АМ-2201 в крови у человека не превышала 5 мкг/л.
Данные о фармакодинамике вещества in vivo пока не выявлены. Однако известно, что он обладает высокой аффинностью связывания с каннабиноидными рецепторами первого типа, выражающейся в IC50 (захват 50% рецепторов) - 1,0 нМ и с каннабиноидными рецепторами второго типа - 2,6 нМ, по сравнению с аффинностью дельта-9-тетрагидроканнабинола (ТГК) - 40,7 нМ для CB1- и 36,4 нМ для CB2-рецепторов. Более того, в исследованиях in vitro с анализом связывания [35S] гуанозин-5'-O-(3-тио)-трифосфата ([35S]GTPγS) 50% эффективная концентрация (EC50) определена в 0,24 нМ при полных агонистических свойствах вещества в отношении рецепторов. Основываясь на этих данных и клинических наблюдениях, можно предположить, что АМ-2201 проявляет типичные эффекты CB1-агонистов. Эти эффекты могут включать седацию, когнитивную дисфункцию, тахикардию, постуральную гипотензию, сухость во рту, атаксию, иммуносупрессию и психотропные эффекты. Выраженным отличием от ТГК является образование под действием АМ-2201 потенциально фармакологически активных метаболитов. В то время как в случае ТГК психоактивными свойствами обладает только один из основных метаболитов, который сохраняет сродство к каннабиноидным рецепторам (11-OH-THC: Ki на CB1-рецепторе: 38,4 ± 0,8 нМ). Пара метаболитов AM-2201 сохраняет высокую аффинность связывания с CB1-рецепторами с относительным рейтингом связывания AM-2201 > AM-2201 N-(4-OH-пентил) = JWH-018 N-(5-OH-пентил) > THC > JWH-073 N-(4-OH-бутил). Глюкоронидированный метаболит JWH-018 N-(5-OH-пентил) сохраняет сродство к рецептору CB1 и активность в качестве нейтрального антагониста (Ki: 922 нМ). Нет данных о том, способен ли этот метаболит антагонизировать фармакологические эффекты JWH-018 in vivo, и образуются ли достаточные концентрации в месте действия.
Клинические эффекты, дозы и токсичность АМ-2201.
Содержание АМ-2201 в различных "травяных смесях" неоднородно и может варьироваться (по разным источникам) от 1 до 300 мг/г. Средний показатель колеблется в пределах 30 мг/г. Учитывая тот факт, что наиболее распространенным способом употребления АМ-2201 является курение, определение точных доз в смеси невозможно. Однако, проанализировав данные исследований, можно составить градацию доз чистого вещества по процентному содержанию ТГК и КБД в нем. Так, начальная минимальная доза (с учетом данных EMCDDA) АМ-2201, с которой связаны значительные и ощутимые клинические эффекты, составляет 3-4 мкг/кг. Средние дозы варьируют от 8 до 17 мкг/кг. Любая доза, превышающая 20 мкг/кг, является высокой и подразумевает самый высокий риск развития выраженных побочных эффектов. Учитывая потенциально высокий риск развития побочных эффектов, не рекомендуется использовать АМ-2201 в высоких дозах из-за потери контроля над физическим и психическим состоянием. При ингаляционном введении начало эффекта наступает в течение 5 минут, пик эффекта приходится на 30-50 минут. Эффект может длиться в течение 60-180 минут, постэффектный период длится до 5 часов в зависимости от дозы.
К положительным желательным эффектам вещества относятся те же эффекты, что и при употреблении ТГК: эйфория, умеренное расслабление, жизнерадостное поведение, некоторые иллюзии и так далее. Однако, учитывая тот факт, что AM-2201 является синтетическим каннабиноидом (и в силу своей фармакодинамической специфичности), он обладает более выраженными побочными эффектами, к которым относятся: покачивание (шаткая походка), нарушение координации, повышение артериального давления (или выраженное снижение) и пульса, афазия, судороги, агрессивное поведение, замедленные движения, покраснение конъюнктивы, галлюцинации, сонливость, сопор или кома, дрожание век, кровотечение из десен, мидриаз, дезориентация, тревожность и паранойя, депрессия (в постэффекте), синдром деперсонализации/дереализации встречается редко. Также к негативным эффектам относятся тахикардия, возбуждение, галлюцинации, гипертония, незначительное повышение уровня глюкозы в крови, гипокалиемия, рвота, боль в груди, судороги, миоклония, сильное беспокойство, приводящее к паническим атакам и острому психозу.
Токсичность AM-2201 была изучена только на первичных нейронных клетках переднего мозга и показала индукцию цитотоксичности в зависимости от концентрации. При преинкубации с селективным антагонистом CB1 цитотоксичность АМ-2201 (30 мкМ) угнеталась, что указывает на важную роль рецепторов CB1 в индукции цитотоксичности этой линии клеток, а не на другие механизмы. Более того, цитотоксичность АМ-2201 происходит через апоптоз и опосредуется каспазами, что указывает на сильный нейротоксический эффект. В связи с липофильной природой этого вещества нельзя исключить, что более высокие концентрации имеют место в глубоких отделах (за счет эффекта накопления) или в эпителиальных клетках пищеварительного тракта (которые непосредственно подвергаются воздействию дыма или чистого вещества). Нейротоксичность АМ-2201 подтверждается тем, что эндоканнабиноидная система формируется в развивающейся центральной нервной системе уже с момента зачатия, а также тем, что каннабимиметик -55,212-2, вмешиваясь в эндоканнабиноидную систему, вызывает анэнцефалию и нейроповеденческие нарушения у потомства. Также можно предположить, что, учитывая физико-химические свойства вещества, оно может проникать в ткани плода через плаценту. Наиболее распространенными клиническими симптомами абстиненции являются: тревога, неустойчивое настроение, вспышки плача, ощущение внутренней пустоты, одышка, гиперакузия, соматические боли, гипервентиляция, интенсивное потоотделение, двигательное и внутреннее беспокойство, бессонница, кашель, нарушение концентрации внимания.
К положительным желательным эффектам вещества относятся те же эффекты, что и при употреблении ТГК: эйфория, умеренное расслабление, жизнерадостное поведение, некоторые иллюзии и так далее. Однако, учитывая тот факт, что AM-2201 является синтетическим каннабиноидом (и в силу своей фармакодинамической специфичности), он обладает более выраженными побочными эффектами, к которым относятся: покачивание (шаткая походка), нарушение координации, повышение артериального давления (или выраженное снижение) и пульса, афазия, судороги, агрессивное поведение, замедленные движения, покраснение конъюнктивы, галлюцинации, сонливость, сопор или кома, дрожание век, кровотечение из десен, мидриаз, дезориентация, тревожность и паранойя, депрессия (в постэффекте), синдром деперсонализации/дереализации встречается редко. Также к негативным эффектам относятся тахикардия, возбуждение, галлюцинации, гипертония, незначительное повышение уровня глюкозы в крови, гипокалиемия, рвота, боль в груди, судороги, миоклония, сильное беспокойство, приводящее к паническим атакам и острому психозу.
Токсичность AM-2201 была изучена только на первичных нейронных клетках переднего мозга и показала индукцию цитотоксичности в зависимости от концентрации. При преинкубации с селективным антагонистом CB1 цитотоксичность АМ-2201 (30 мкМ) угнеталась, что указывает на важную роль рецепторов CB1 в индукции цитотоксичности этой линии клеток, а не на другие механизмы. Более того, цитотоксичность АМ-2201 происходит через апоптоз и опосредуется каспазами, что указывает на сильный нейротоксический эффект. В связи с липофильной природой этого вещества нельзя исключить, что более высокие концентрации имеют место в глубоких отделах (за счет эффекта накопления) или в эпителиальных клетках пищеварительного тракта (которые непосредственно подвергаются воздействию дыма или чистого вещества). Нейротоксичность АМ-2201 подтверждается тем, что эндоканнабиноидная система формируется в развивающейся центральной нервной системе уже с момента зачатия, а также тем, что каннабимиметик -55,212-2, вмешиваясь в эндоканнабиноидную систему, вызывает анэнцефалию и нейроповеденческие нарушения у потомства. Также можно предположить, что, учитывая физико-химические свойства вещества, оно может проникать в ткани плода через плаценту. Наиболее распространенными клиническими симптомами абстиненции являются: тревога, неустойчивое настроение, вспышки плача, ощущение внутренней пустоты, одышка, гиперакузия, соматические боли, гипервентиляция, интенсивное потоотделение, двигательное и внутреннее беспокойство, бессонница, кашель, нарушение концентрации внимания.
Last edited by a moderator: