Introducere.
Scopul principal al acestei cercetări este evaluarea posibilității de determinare a principalelor medicamente în fluidele biologice prin metode exprese disponibile publicului la domiciliu. Acest articol răspunde la următoarele întrebări.
- Testele de farmacie pentru 3-20 de dolari dezvăluie într-adevăr faptul utilizării substanțelor declarate? (Benzile de testare combinate clasice conțin scale pentru determinarea amfetaminei, metamfetaminei, cocainei, marijuanei, opiaceelor).
- Aceste benzi de testare ar putea fi utile pentru Alpha-PVP și Mefedronă? (Nu există teste specializate în farmacii)
Motivul utilizării celor mai comune teste de farmacie, care sunt ușor de cumpărat, este un că cercetarea ar trebui să fie utilă și să aibă o aplicație practică.
Important: ar putea fi utilizate alte kituri de testare a fluxului lateral (LFT) cu etichete diferite, compania producătoare nu contează, deoarece orice kit de testare are același mecanism de funcționare și are eficiență comparabilă.
Despre LFT.
Testele cu flux lateral (LFT), cunoscute și sub denumirea de teste imunocromatografice cu flux lateral sau teste rapide, sunt dispozitive simple menite să detecteze prezența unei substanțe țintă într-o probă lichidă fără a fi nevoie de echipamente specializate și costisitoare. Aceste teste sunt utilizate pe scară largă în diagnosticarea medicală pentru testarea la domiciliu, la punctul de îngrijire sau în laborator. De exemplu, testul de sarcină la domiciliu este un LFT care detectează un hormon specific. Aceste teste sunt simple, economice și, în general, prezintă rezultate în aproximativ cinci până la 30 de minute. Multe aplicații de laborator sporesc sensibilitatea LFT-urilor simple prin utilizarea de echipamente dedicate suplimentare.
Testele LFT funcționează pe aceleași principii ca și testele imunoenzimatice (ELISA). În esență, aceste teste rulează proba lichidă de-a lungul suprafeței unui tampon cu molecule reactive care indică un rezultat vizual pozitiv sau negativ. Tampoanele se bazează pe o serie de paturi capilare, cum ar fi bucăți de hârtie poroasă, polimer microstructurat sau polimer sinterizat. Fiecare dintre aceste tampoane are capacitatea de a transporta spontan fluide (de exemplu, urină, sânge, salivă).
Tamponul de probă acționează ca un burete și reține un exces de lichid de probă. Odată îmbibat, lichidul curge către al doilea tampon conjugat, în care producătorul a depozitat particule bioactive liofilizate numite conjugate (a se vedea mai jos) într-o matrice de sare-sucru. Tamponul conjugat conține toți reactivii necesari pentru o reacție chimică optimizată între molecula țintă (de exemplu, un antigen) și partenerul său chimic (de exemplu, un anticorp) care a fost imobilizat pe suprafața particulei. Aceste mărci marchează particulele țintă pe măsură ce acestea trec prin tampon și continuă până la liniile de testare și de control. Linia de testare prezintă un semnal, adesea o culoare, ca în cazul testelor de sarcină. Linia de control conține liganzi de afinitate care arată dacă proba a trecut și dacă biomoleculele din tamponul conjugat sunt active. După trecerea prin aceste zone de reacție, lichidul intră în materialul poros final, fitilul, care acționează pur și simplu ca un container de deșeuri.
Testele LFT funcționează pe aceleași principii ca și testele imunoenzimatice (ELISA). În esență, aceste teste rulează proba lichidă de-a lungul suprafeței unui tampon cu molecule reactive care indică un rezultat vizual pozitiv sau negativ. Tampoanele se bazează pe o serie de paturi capilare, cum ar fi bucăți de hârtie poroasă, polimer microstructurat sau polimer sinterizat. Fiecare dintre aceste tampoane are capacitatea de a transporta spontan fluide (de exemplu, urină, sânge, salivă).
Tamponul de probă acționează ca un burete și reține un exces de lichid de probă. Odată îmbibat, lichidul curge către al doilea tampon conjugat, în care producătorul a depozitat particule bioactive liofilizate numite conjugate (a se vedea mai jos) într-o matrice de sare-sucru. Tamponul conjugat conține toți reactivii necesari pentru o reacție chimică optimizată între molecula țintă (de exemplu, un antigen) și partenerul său chimic (de exemplu, un anticorp) care a fost imobilizat pe suprafața particulei. Aceste mărci marchează particulele țintă pe măsură ce acestea trec prin tampon și continuă până la liniile de testare și de control. Linia de testare prezintă un semnal, adesea o culoare, ca în cazul testelor de sarcină. Linia de control conține liganzi de afinitate care arată dacă proba a trecut și dacă biomoleculele din tamponul conjugat sunt active. După trecerea prin aceste zone de reacție, lichidul intră în materialul poros final, fitilul, care acționează pur și simplu ca un container de deșeuri.
Există două tipuri de LFT: metoda directă și metoda competitivă.
LFT directă (sandwich) utilizează un conjugat anticorp-etichetă inflicat pe o membrană conjugată. Anticorpii specifici acestui analit sunt imobilizați pe linia de testare, iar anticorpii anti-specii specifici anticorpilor primari sunt imobilizați pe linia de control. Atunci când proba, care conține o substanță analizată, este aplicată pe banda de testare și această probă lovește membrana cu conjugat, analitul se leagă de conjugatul AT-tag. Apoi, complexul imun intră în zona de testare, unde se leagă de anticorpii specifici, formând un "sandwich" de Ab-Ag-Ab-tag. Excesul de conjugat nelegat se leagă de anticorpii antispecifici de pe linia de control. Prin urmare, 2 linii pe banda de testare reprezintă un rezultat pozitiv al testului. Dacă în eșantionnu există substanță analizată, conjugatul se leagă de anticorpii antispecii numai pe linia de control, formând o singură linie pe banda de testare. Metoda LFT directă este utilizată pentru detectarea compușilor cu greutate moleculară mare - viruși, inclusiv HIV; diferiți hormoni (de exemplu, în testele de sarcină), agenți patogeni ai bolilor infecțioase.
MetodaLFT competitivă utilizată pentru determinarea compușilor cu greutate moleculară mică se bazează pe competiția dintre analit și conjugatul analit:proteină purtătoare imobilizat pentru un număr limitat de locuri de legare pentru anticorpii specifici conținuți în conjugatul Ab-tag. Atunci când se aplică o probă care conține analitul, acesta se leagă de conjugatul AT-tag de pe membrana conjugată. Apoi, complexul imun trece prin zona de testare, unde este imobilizat conjugatul analit:proteină purtătoare. Imunocomplexul nu se poate lega de acest conjugat din cauza obstacolelor sterice: compușii cu greutate moleculară mică au de obicei un singur determinant antigenic și, în consecință, anticorpii au un singur site de legare a antigenului, care este deja ocupat de analit. Apoi, complexul imun este legat de anticorpii antispecie de pe linia de control. Ca urmare, absența unei benzi colorate în zona de testare și prezența unei culori în zona de control indică faptul că concentrația analitului din proba testată depășește valoarea sa de prag pentru acest test.
În cazul în care nu există analiză în eșantion, conjugatul Ab-tag se leagă de conjugatul Ag:proteină purtătoare imobilizat în zona liniei de testare. Conjugatul Ab-tag nelegat intră în zona liniei de control și se leagă acolo de anticorpii antispecii. Astfel, prezența a două linii colorate (test și control) reprezintă un rezultat negativ al analizei.
Formatul LFT competitiv este utilizat pentru detectarea compușilor cu greutate moleculară mică, inclusiv a metaboliților compușilor narcotici în urină, lichid oral și extracte tisulare.
MetodaLFT competitivă utilizată pentru determinarea compușilor cu greutate moleculară mică se bazează pe competiția dintre analit și conjugatul analit:proteină purtătoare imobilizat pentru un număr limitat de locuri de legare pentru anticorpii specifici conținuți în conjugatul Ab-tag. Atunci când se aplică o probă care conține analitul, acesta se leagă de conjugatul AT-tag de pe membrana conjugată. Apoi, complexul imun trece prin zona de testare, unde este imobilizat conjugatul analit:proteină purtătoare. Imunocomplexul nu se poate lega de acest conjugat din cauza obstacolelor sterice: compușii cu greutate moleculară mică au de obicei un singur determinant antigenic și, în consecință, anticorpii au un singur site de legare a antigenului, care este deja ocupat de analit. Apoi, complexul imun este legat de anticorpii antispecie de pe linia de control. Ca urmare, absența unei benzi colorate în zona de testare și prezența unei culori în zona de control indică faptul că concentrația analitului din proba testată depășește valoarea sa de prag pentru acest test.
În cazul în care nu există analiză în eșantion, conjugatul Ab-tag se leagă de conjugatul Ag:proteină purtătoare imobilizat în zona liniei de testare. Conjugatul Ab-tag nelegat intră în zona liniei de control și se leagă acolo de anticorpii antispecii. Astfel, prezența a două linii colorate (test și control) reprezintă un rezultat negativ al analizei.
Formatul LFT competitiv este utilizat pentru detectarea compușilor cu greutate moleculară mică, inclusiv a metaboliților compușilor narcotici în urină, lichid oral și extracte tisulare.
Explicație mai simplă.
Dacă nu înțelegeți, v-aș explica într-un mod mai simplu. Există anticorpi marcați la începutul fiecărei benzi de testare. Datorită structurii benzii de testare, urina se răspândește de-a lungul acesteia, transportând complexele rezultate în zona de testare, unde sunt fixate ligamentele medicament-proteină. Deoarece anticorpul din complexul imun ajuns este deja preluat de medicamentul din urină, acesta nu se poate fixa în zona de testare și se deplasează mai departe în zona de control, unde se leagă de anticorpul antispecie, colorând o bandă pe scală (rezultat pozitiv).
Dacă nu există droguri în proba biologică, anticorpii se deplasează în urină de-a lungul benzii de testare, rămânând liberi. Atunci când complexul anticorp-proteină se întâlnește în zona de testare, o parte din anticorpii marcați se fixează pe acesta (apare prima bandă), restul se deplasează cu fluxul de urină în zona de control, unde se leagă, de asemenea, de anticorpul antispecie, colorând a doua bandă (2 benzi - rezultat negativ). Dacă linia apare în zona de testare, dar nu apare în zona de control (ar trebui să apară întotdeauna) - testul este defect.
Dacă nu există droguri în proba biologică, anticorpii se deplasează în urină de-a lungul benzii de testare, rămânând liberi. Atunci când complexul anticorp-proteină se întâlnește în zona de testare, o parte din anticorpii marcați se fixează pe acesta (apare prima bandă), restul se deplasează cu fluxul de urină în zona de control, unde se leagă, de asemenea, de anticorpul antispecie, colorând a doua bandă (2 benzi - rezultat negativ). Dacă linia apare în zona de testare, dar nu apare în zona de control (ar trebui să apară întotdeauna) - testul este defect.
Substanțele au fost utilizate de voluntari care nu au luat nimic psihoactiv pentru o perioadă suficientă de timp, urina fiind prelevată pentru analiza lor. Iată rezultatele experimentului.
Experimente.
AMPHETAMINAMetaboliți majori: amfetamină, 4-hidroxi-amfetamină, 4-hidroxiorrefedrină, 4-hidroxifenilacetonă, acid benzoic, acid hipuric, norefedrină, fenilacetonă.
COCAINA.
Metaboliți majori: benzoylecgonina, ecgonina metil ester, ecgonina, norcocaina, p-hidroxicaina, m-hidroxicaina, p-hidroxibenzoylecgonina, m-hidroxibenzoylecgonina.
Dacă vă uitați la testul din dreapta, puteți vedea de ce benzile de testare trebuie tratate cu un punct de vedere critic. Persoana testată nu a consumat recent niciun PAS, cu excepția cocainei.
HEROINA.
Metaboliți majori: morfină, normorfină, hidromorfonă.
MDMA / ECSTASY.
Metaboliți majori: 3,4-metilendioximetamfetamină (MDMA), 3,4-metilendioxiamfetamină (MDA), 4-hidroxi-3-metoximetamfetamină (HMMA), 4-hidroxi-3-metoxiamfetamină (HMA).
Există benzi de testare MDMA / Ecstasy disponibile, dar acestea sunt mai greu de găsit. Amfetamina și metamfetamina au fost găsite în urină. Acest lucru se explică prin apartenența lor comună la aceeași clasă și, în consecință, prin similitudinea structurală a substanțelor și a metaboliților acestora. Scalele THC (canabinoide) și OPI (opiacee) de pe al doilea test nu participă la experiment (nu sunt activate). Conform fotografiei din stânga, aceste substanțe nu sunt detectate în legătură cu consumul de MDMA.
MEFEDRONA.
Metaboliți majori: mefedrona, nor-mefedrona, 4'-carboxi-mefedrona, 1'-dihidro-mefedrona, N-succinil-nor-mefedrona.
Un comentariu interesant din partea editorilor site-ului https://www.zoomtesting.co.uk: "Unii vânzători subliniază faptul că un test de metamfetamină poate fi utilizat pentru a detecta mefedrona. Totuși, acest lucru este incorect. Structura chimică a metamfetaminei și a mefedronei este diferită, astfel încât testul pentru metamfetamină nu va fi valabil pentru mefedronă". Ei bine, să verificăm.
În plus față de substanțele standard, o altă bandă de testare a fost utilizată pentru a testa barbituricele. Este clar că ceva nu este în regulă cu această bandă de testare. Testul a fost repetat de un alt voluntar care nu consumase niciodată barbiturice sau preparate care le conțin, rezultatul fiind similar.
ALFA-PVP (alfa-pirrolidinovalerofenonă).
A doua linie din fereastra PCP este aproape complet absentă.
MARIJUANA.
Metaboliți majori: tetrahidrocannabinol (THC), 11-hidroxi-THC, 11-nor-9-carboxi-THC. Cannabis bine determinat și întotdeauna numai în fereastra sa "THC" (tetrahidrocannabinol), este suficient să se demonstreze pe cel mai simplu test.
Concluzie.
Testele detectează droguri în fluidele corporale de mult mai mult timp decât se simte efectul lor psihoactiv. Acestea sunt destul de ieftine, au o sensibilitate bună și sunt doar marginal inferioare metodelor utilizate în laborator. Nu uitați de siguranța dumneavoastră - dacă este nevoie să vă verificați singur "curățenia", testele expres vor fi indispensabile.
Last edited by a moderator: