Crispr-methodologieën zijn weliswaar nuttig en zeer eenvoudig te gebruiken door ingewijden, maar nog steeds zeer complex. Heb je ervaring met synthetische biologie? Ken je de verschillende elementen in een gen die de intensiteit en de omstandigheden bepalen waarin het tot expressie komt? Wat weet je over de genetische code, codonoptimalisatie, primerontwerp, klonen en expressievectoren, de structuur van het CRISPR-Cas9 complex? Dit zijn geen willekeurige woorden, het zijn allemaal concepten die je volledig onder de knie moet hebben voordat je met succes een zoogdiercel kunt transfecteren, laat staan je eigen cel.
Om een gen te krijgen dat je wilt, moet je eerst de sequentie ervan vinden in een gen-database, wat heel gemakkelijk is en vrij beschikbaar online, evenals een geschikte promotor, deze twee elementen aan elkaar plakken, evenals PCR-primers (met restrictieplaatsen voor vertering door restrictie-enzymen), en dit naar een bedrijf voor aangepaste DNA-synthese sturen. Er zijn er een heleboel, sommige zijn veel goedkoper dan andere.
Anders kun je alleen de promotorstreng kopen en het gen van je interesse via PCR uit een natuurlijke bron halen of het gen direct kopen als het een veelgebruikt gen is, zoals het luciferasesysteem (maar waarom zou je in het donker willen gloeien, lol).
Vervolgens kun je dit in een CRISPR-plasmide invoegen, samen met een geschikte geleidestreng om een specifieke locatie in het genoom te targeten.
Je kunt het youtubekanaal "the thought emporium" opzoeken, die zo'n experiment op zichzelf heeft uitgevoerd, maar onderzoek je project minstens een paar jaar voordat je ermee doorgaat.