A Crispr-módszerek, bár hasznosak és a beavatottak számára nagyon egyszerűen használhatók, mégis nagyon összetettek. Van tapasztalata a szintetikus biológia területén? Ismeri a génben jelen lévő különböző elemeket, amelyek meghatározzák a gén kifejeződésének intenzitását és körülményeit? Mit tud a genetikai kódról, a kodonoptimalizálásról, a primerek tervezéséről, a klónozási és expressziós vektorokról, a CRISPR-Cas9 komplex szerkezetéről? Ezek nem véletlenszerű szavak, ezek mind olyan fogalmak, amelyeket teljes mértékben el kell sajátítania, mielőtt sikeresen transzfektálhatna egy emlőssejtet, nem is beszélve a sajátjáról.
Ahhoz, hogy megkapd a kívánt gént, először is meg kell találnod a szekvenciáját egy génadatbázisban, ami nagyon egyszerű és szabadon elérhető az interneten, valamint egy megfelelő promótert, össze kell illesztened ezt a két elemet, valamint PCR-primereket (restrikciós helyekkel a restrikciós enzimek általi emésztéshez), és ezt el kell küldened egy egyedi DNS-szintézissel foglalkozó cégnek. Van egy csomó ilyen, egyesek sokkal olcsóbbak, mint mások.
Egyébként csak a promóterszálat vásárolhatja meg, és a kívánt gént PCR-rel szerezheti be egy természetes forrásból, vagy közvetlenül megvásárolhatja a gént, ha ez egy közös, mint például a luciferáz rendszer (de miért akarna világítani a sötétben lol).
Ezután ezt beillesztheti egy CRISPR-plazmidba, valamint egy megfelelő vezető szálba, hogy a genom egy adott helyét célozza meg.
Megnézheted a youtube csatornát "the thought emporium", amely egy ilyen kísérletet végzett magán, de KÉRLEK kutatni a projektet legalább néhány évig, mielőtt végigcsinálnád!