Bevezetés.
A kutatás fő célja a főbb gyógyszerek biológiai folyadékokban való meghatározásának lehetőségének értékelése nyilvánosan elérhető expressz módszerekkel otthon. Ez a cikk a következő kérdésekre ad választ.
- A 3-20 dolláros gyógyszertári teszt valóban kimutatja a bejelentett anyagok használatának tényét? (A klasszikus kombinált tesztcsíkok amfetamin, metamfetamin, kokain, marihuána, ópiátok meghatározására szolgáló skálákat tartalmaznak).
- Hasznosak lehetnek ezek a tesztcsíkok az alfa-PVP és a mefedron esetében? (A gyógyszertárakban nincsenek speciális tesztek).
A legelterjedtebb gyógyszertári tesztek használatának oka, amelyek könnyen megvásárolhatók, az, hogy a kutatás hasznos legyen és gyakorlati alkalmazással bírjon.
Fontos: más oldalsó áramlási tesztek (LFT-k) különböző címkékkel ellátott készleteket lehet használni, a gyártó cég nem számít, mert bármelyik tesztkészlet csíkjai ugyanolyan működési mechanizmussal rendelkeznek, és összehasonlítható hatékonysággal rendelkeznek.
Az LFT-ről.
A laterális áramlási tesztek (LFT-k), más néven laterális áramlási immunkromatográfiás próbák vagy gyorstesztek, olyan egyszerű eszközök, amelyek célja egy célanyag jelenlétének kimutatása folyékony mintában, speciális és költséges berendezések nélkül. Ezeket a teszteket széles körben használják az orvosi diagnosztikában otthoni tesztelésre, az ellátás helyén történő vizsgálatra vagy laboratóriumi használatra. Az otthoni terhességi teszt például egy LFT, amely egy specifikus hormont mutat ki. Ezek a tesztek egyszerűek, gazdaságosak és általában körülbelül öt-30 perc alatt mutatnak eredményt. Számos laboratóriumi alkalmazás növeli az egyszerű LFT-k érzékenységét további speciális berendezések alkalmazásával.
Az LFT-k ugyanazon az elven működnek, mint az enzimhez kötött immunszorbiens tesztek (ELISA). Lényegében ezek a tesztek a folyékony mintát egy reaktív molekulákat tartalmazó párna felületén vezetik végig, amely vizuálisan pozitív vagy negatív eredményt mutat. A párnák alapja egy sor kapilláris ágy, például porózus papír, mikroszerkezetű polimer vagy szinterezett polimer darabjai. Mindegyik párna képes a folyadék (pl. vizelet, vér, nyál) spontán szállítására.
A mintatampon szivacsként viselkedik, és megtartja a mintafolyadék feleslegét. Miután a folyadék átázott, a folyadék a második konjugált párnába áramlik, amelyben a gyártó fagyasztva szárított bioaktív részecskéket, úgynevezett konjugátumokat (lásd alább) tárolt só-cukor mátrixban. A konjugált pad tartalmazza a célmolekula (pl. antigén) és a részecske felületén immobilizált kémiai partnere (pl. antitest) közötti optimális kémiai reakcióhoz szükséges összes reagenseket. Ezek jelölik a célrészecskéket, amint áthaladnak a padon, és továbbhaladnak a teszt- és kontrollvonalakon. A tesztvonal egy jelet mutat, gyakran egy színt, mint a terhességi teszteknél. A kontrollvonal affinitásligandumokat tartalmaz, amelyek megmutatják, hogy a minta átáramlott-e rajta, és a konjugált padban lévő biomolekulák aktívak-e. Miután áthaladt ezeken a reakciózónákon, a folyadék a végső porózus anyagba, a kanócba kerül, amely egyszerűen hulladéktartályként működik.
Az LFT-k ugyanazon az elven működnek, mint az enzimhez kötött immunszorbiens tesztek (ELISA). Lényegében ezek a tesztek a folyékony mintát egy reaktív molekulákat tartalmazó párna felületén vezetik végig, amely vizuálisan pozitív vagy negatív eredményt mutat. A párnák alapja egy sor kapilláris ágy, például porózus papír, mikroszerkezetű polimer vagy szinterezett polimer darabjai. Mindegyik párna képes a folyadék (pl. vizelet, vér, nyál) spontán szállítására.
A mintatampon szivacsként viselkedik, és megtartja a mintafolyadék feleslegét. Miután a folyadék átázott, a folyadék a második konjugált párnába áramlik, amelyben a gyártó fagyasztva szárított bioaktív részecskéket, úgynevezett konjugátumokat (lásd alább) tárolt só-cukor mátrixban. A konjugált pad tartalmazza a célmolekula (pl. antigén) és a részecske felületén immobilizált kémiai partnere (pl. antitest) közötti optimális kémiai reakcióhoz szükséges összes reagenseket. Ezek jelölik a célrészecskéket, amint áthaladnak a padon, és továbbhaladnak a teszt- és kontrollvonalakon. A tesztvonal egy jelet mutat, gyakran egy színt, mint a terhességi teszteknél. A kontrollvonal affinitásligandumokat tartalmaz, amelyek megmutatják, hogy a minta átáramlott-e rajta, és a konjugált padban lévő biomolekulák aktívak-e. Miután áthaladt ezeken a reakciózónákon, a folyadék a végső porózus anyagba, a kanócba kerül, amely egyszerűen hulladéktartályként működik.
Kétféle LFT-típus létezik: a közvetlen és a kompetitív módszer.
A közvetlen (szendvics) LFT egy konjugált membránra felvitt antitest-tag konjugátumot használ. Az adott analitra specifikus antitesteket a tesztvonalon, az elsődleges antitestekre specifikus anti-fajta antitesteket pedig a kontrollvonalon immobilizálják. Amikor az analizált anyagot tartalmazó mintát a tesztcsíkra juttatjuk, és ez a minta a konjugátummal ellátott membránhoz ér, az analit kötődik az AT-tag konjugátumhoz. Ezután az immunkomplex belép a tesztzónába, ahol a specifikus antitestekhez kötődik, és egy Ab-Ag-Ab-tag "szendvicset" alkot. A nem kötött konjugátum feleslege a kontrollvonalon lévő fajellenes antitestekhez kötődik. Ezért 2 vonal a tesztcsíkon pozitív teszteredményt jelent. Ha a mintábannincs elemzett anyag, a konjugátum csak a kontrollvonalon kötődik a fajellenes antitestekhez, és így a tesztcsíkon egy vonalat képez. A közvetlen LFT-módszert nagy molekulasúlyú vegyületek - vírusok, köztük a HIV; különböző hormonok (például terhességi tesztekben), fertőző betegségek kórokozóinak kimutatására használják.
Az alacsony molekulatömegű vegyületek meghatározására használtkompetitív LFT-módszer az analit és az immobilizált analit:hordozófehérje konjugátum közötti versenyen alapul az Ab-tag konjugátumban található specifikus antitestek korlátozott számú kötőhelyéért. Amikor az analitot tartalmazó mintát alkalmazunk, az kötődik az AT-tag konjugátumhoz a konjugált membránon. Ezután az immunkomplex áthalad a vizsgálati zónán, ahol az analit:hordozófehérje konjugátum immobilizálódik. Az immunkomplex nem tud kötődni ehhez a konjugátumhoz a sztérikus akadályok miatt: az alacsony molekulatömegű vegyületek általában egy antigéndeterminánssal rendelkeznek, és ennek megfelelően az antitesteknek egy antigénkötő helyük van, amelyet az analit már elfoglalt. Ezután az immunkomplexet a kontrollvonalon lévő fajellenes antitestek kötik meg. Ennek eredményeképpen a színes sáv hiánya a vizsgálati zónában és a szín jelenléte a kontroll zónában azt jelzi, hogy az analit koncentrációja a vizsgálati mintában meghaladja az erre a vizsgálatra vonatkozó küszöbértéket.
Ha nincs analit a mintában, az Ab-tag konjugátum kötődik a tesztvonal zónájában immobilizált Ag:hordozófehérje konjugátumhoz. A nem kötött Ab-tag konjugátum a kontrollvonal zónájába kerül, és ott kötődik a fajellenes antitestekhez. Így a két színes vonal (teszt és kontroll) jelenléte negatív vizsgálati eredményt jelent.
A kompetitív LFT formátumot alacsony molekulatömegű vegyületek, köztük a narkotikus vegyületek metabolitjainak kimutatására használják vizeletben, szájfolyadékban és szövetkivonatokban.
Az alacsony molekulatömegű vegyületek meghatározására használtkompetitív LFT-módszer az analit és az immobilizált analit:hordozófehérje konjugátum közötti versenyen alapul az Ab-tag konjugátumban található specifikus antitestek korlátozott számú kötőhelyéért. Amikor az analitot tartalmazó mintát alkalmazunk, az kötődik az AT-tag konjugátumhoz a konjugált membránon. Ezután az immunkomplex áthalad a vizsgálati zónán, ahol az analit:hordozófehérje konjugátum immobilizálódik. Az immunkomplex nem tud kötődni ehhez a konjugátumhoz a sztérikus akadályok miatt: az alacsony molekulatömegű vegyületek általában egy antigéndeterminánssal rendelkeznek, és ennek megfelelően az antitesteknek egy antigénkötő helyük van, amelyet az analit már elfoglalt. Ezután az immunkomplexet a kontrollvonalon lévő fajellenes antitestek kötik meg. Ennek eredményeképpen a színes sáv hiánya a vizsgálati zónában és a szín jelenléte a kontroll zónában azt jelzi, hogy az analit koncentrációja a vizsgálati mintában meghaladja az erre a vizsgálatra vonatkozó küszöbértéket.
Ha nincs analit a mintában, az Ab-tag konjugátum kötődik a tesztvonal zónájában immobilizált Ag:hordozófehérje konjugátumhoz. A nem kötött Ab-tag konjugátum a kontrollvonal zónájába kerül, és ott kötődik a fajellenes antitestekhez. Így a két színes vonal (teszt és kontroll) jelenléte negatív vizsgálati eredményt jelent.
A kompetitív LFT formátumot alacsony molekulatömegű vegyületek, köztük a narkotikus vegyületek metabolitjainak kimutatására használják vizeletben, szájfolyadékban és szövetkivonatokban.
Egyszerűbb magyarázat.
Ha nem érti, egyszerűbben is elmagyaráznám. Minden tesztcsík elején megjelölt antitestek vannak. A tesztcsík felépítéséből adódóan a vizelet szétterül rajta, és a keletkező komplexeket a tesztterületre szállítja, ahol a kábítószer-fehérje szalagok rögzülnek. Mivel a beérkezett immunkomplexből származó ellenanyagot a vizeletből már felveszi a hatóanyag, a tesztzónában nem tud megtapadni, és továbbhalad a kontrollzónába, ahol a fajellenes ellenanyaghoz kötődik, és a skálán egy csíkot színez (pozitív eredmény).
Ha nincs drog a biomintában, az antitestek a vizeletben a tesztcsík mentén mozognak, szabadon maradnak. Amikor az antitest-fehérje komplex a tesztterületen találkozik, néhány jelölt antitest kötődik hozzá (megjelenik az első csík), a többi a vizeletáramlással együtt a kontrollterületre mozog, ahol szintén kötődik a fajellenes antitesthez, kiemelve a második csíkot (2 csík - negatív eredmény). Ha a csík megjelenik a tesztzónában, de nem jelenik meg a kontrollzónában (mindig meg kell jelennie) - a teszt hibás.
Ha nincs drog a biomintában, az antitestek a vizeletben a tesztcsík mentén mozognak, szabadon maradnak. Amikor az antitest-fehérje komplex a tesztterületen találkozik, néhány jelölt antitest kötődik hozzá (megjelenik az első csík), a többi a vizeletáramlással együtt a kontrollterületre mozog, ahol szintén kötődik a fajellenes antitesthez, kiemelve a második csíkot (2 csík - negatív eredmény). Ha a csík megjelenik a tesztzónában, de nem jelenik meg a kontrollzónában (mindig meg kell jelennie) - a teszt hibás.
Az anyagokat olyan önkéntesek használták, akik megfelelő ideig nem szedtek semmi pszichoaktív anyagot, vizeletet vettek az elemzésükhöz. Íme a kísérlet eredményei.
Kísérletek.
AMPHETAMINFőbb metabolitok: amfetamin, 4-hidroxiamfetamin, 4-hidroxi-norefedrin, 4-hidroxi-fenilaceton, benzoesav, hippursav, norefedrin, fenilaceton.
COCAINE.
Főbb metabolitok: benzoylecgonin, ecgonin-metilészter, ecgonin, norcokain, p-hidroxikain, m-hidroxikain, p-hidroxibenzoylecgonin, m-hidroxibenzoylecgonin.
Ha megnézi a jobb oldali tesztet, láthatja, hogy miért kell a tesztcsíkokat kritikus szemlélettel kezelni. A vizsgált személy a közelmúltban nem használt semmilyen PAS-t, kivéve a kokaint.
HEROIN.
Főbb metabolitjai: morfium, normorfin, hidromorfon.
MDMA / ECSTASY.
Főbb metabolitok: 3,4-metiléndioxi-metamfetamin (MDMA), 3,4-metiléndioxiamfetamin (MDA), 4-hidroxi-3-metoxi-metamfetamin (HMMA), 4-hidroxi-3-metoxi-amfetamin (HMA).
Léteznek MDMA / Ecstasy tesztcsíkok, de ezeket nehezebb megtalálni. A vizeletben amfetamint és metamfetamint találtak. Ezt az azonos osztályba való közös tartozásukkal, és ennek megfelelően az anyagok és metabolitjaik szerkezeti hasonlóságával magyarázzák. A THC (kannabinoidok) és az OPI (opiátok) skálák a második teszten nem vesznek részt a kísérletben (nem aktiválódnak). A bal oldali kép szerint ezek az anyagok nem mutathatók ki az MDMA használatával kapcsolatban.
MEPHEDRONE.
Főbb metabolitok: mefedron, nor-mefedron, 4'-karboxi-mefedron, 1'-dihidro-mefedron, N-szuccinil-nor-mefedron.
Érdekes megjegyzés a https://www.zoomtesting.co.uk oldal szerkesztőitől :"Egyes forgalmazók rámutatnak arra, hogy a metamfetamin teszt használható a mefedron kimutatására. Ez azonban helytelen. A metamfetamin és a mefedron kémiai szerkezete különbözik, így a metamfetamin teszt nem lesz érvényes a mefedronra". Nos, akkor nézzük meg.
A standard anyagokon kívül még egy tesztcsíkot használtak a barbiturátok tesztelésére. Ezzel a tesztcsíkkal egyértelműen valami baj van. A tesztet megismételték egy másik önkéntessel, aki soha nem használt barbiturátokat vagy barbiturát tartalmú készítményeket, hasonló eredménnyel.
ALPHA-PVP (alfa-pirrolidinovalerophenon).
A második vonal a PCP ablakban szinte teljesen hiányzik.
MARIJUANA.
Főbb metabolitok: tetrahidrokannabinol (THC), 11-hidroxi-THC, 11-nor-9-karboxi-THC. Cannabis jól meghatározható és mindig csak az ablakában "THC" (tetrahidrokannabinol), elég a legegyszerűbb teszten kimutatni.
Következtetés.
A tesztek már sokkal régebben mutatják ki a kábítószert a testnedvekben, mint amióta a pszichoaktív hatása érezhető. Elég olcsók, jó érzékenységűek, és csak kis mértékben maradnak el a laboratóriumban alkalmazott módszerektől. Ne feledje a biztonságát - ha szükség van arra, hogy saját maga ellenőrizze a "tisztaságát", az expressz tesztek nélkülözhetetlenek lesznek.
Last edited by a moderator: