Introduction.
L'objectif principal de cette recherche est d'évaluer la possibilité de déterminer les principaux médicaments dans les fluides biologiques par des méthodes express disponibles publiquement à domicile. Cet article répond aux questions suivantes.
- Les tests de pharmacie pour les 3-20 dollars révèlent-ils réellement l'utilisation des substances déclarées ? (Les bandelettes de test combinées classiques contiennent des échelles pour la détermination de l'amphétamine, de la méthamphétamine, de la cocaïne, de la marijuana et des opiacés).
- Ces bandelettes peuvent-elles être utiles pour l'Alpha-PVP et la Mephedrone (il n'existe pas de tests spécialisés dans les pharmacies) ?
La raison d'utiliser le test le plus courant en pharmacie, facile à acheter, est que la recherche devrait être utile et avoir une application pratique.
Important : il est possible d'utiliser d'autres kits de tests de flux latéral (LFT) portant des étiquettes différentes. La société du fabricant n'a pas d'importance, car tous les kits de tests ont le même mécanisme de fonctionnement et ont une efficacité comparable.
À propos des LFT.
Les tests de flux latéral (LFT), également connus sous le nom de tests immunochromatographiques de flux latéral ou de tests rapides, sont des dispositifs simples destinés à détecter la présence d'une substance cible dans un échantillon liquide sans nécessiter d'équipement spécialisé et coûteux. Ces tests sont largement utilisés dans les diagnostics médicaux pour les tests à domicile, les tests sur le lieu de soins ou en laboratoire. Par exemple, le test de grossesse à domicile est un LFT qui détecte une hormone spécifique. Ces tests sont simples, économiques et donnent généralement des résultats en cinq à trente minutes. De nombreuses applications en laboratoire augmentent la sensibilité des simples LFT en utilisant un équipement supplémentaire dédié.
Les LFT fonctionnent selon les mêmes principes que les tests immuno-enzymatiques (ELISA). Essentiellement, ces tests font passer l'échantillon liquide sur la surface d'un tampon contenant des molécules réactives qui donnent un résultat visuel positif ou négatif. Les tampons sont basés sur une série de lits capillaires, tels que des morceaux de papier poreux, de polymère microstructuré ou de polymère fritté. Chacun de ces tampons a la capacité de transporter spontanément un liquide (urine, sang, salive, etc.).
Le tampon d'échantillonnage agit comme une éponge et retient un excès de liquide d'échantillonnage. Une fois imbibé, le liquide s'écoule vers le deuxième tampon de conjugaison, dans lequel le fabricant a stocké des particules bioactives lyophilisées appelées conjugués (voir ci-dessous) dans une matrice sel-sucre. Le tampon de conjugaison contient tous les réactifs nécessaires à une réaction chimique optimisée entre la molécule cible (par exemple, un antigène) et son partenaire chimique (par exemple, un anticorps) qui a été immobilisé à la surface de la particule. Ces marques ciblent les particules lorsqu'elles traversent le tampon et se poursuivent jusqu'aux lignes de test et de contrôle. La ligne de test affiche un signal, souvent une couleur, comme dans les tests de grossesse. La ligne de contrôle contient des ligands d'affinité qui indiquent si l'échantillon a traversé et si les biomolécules du tampon conjugué sont actives. Après avoir traversé ces zones de réaction, le liquide pénètre dans le matériau poreux final, la mèche, qui sert simplement de conteneur à déchets.
Les LFT fonctionnent selon les mêmes principes que les tests immuno-enzymatiques (ELISA). Essentiellement, ces tests font passer l'échantillon liquide sur la surface d'un tampon contenant des molécules réactives qui donnent un résultat visuel positif ou négatif. Les tampons sont basés sur une série de lits capillaires, tels que des morceaux de papier poreux, de polymère microstructuré ou de polymère fritté. Chacun de ces tampons a la capacité de transporter spontanément un liquide (urine, sang, salive, etc.).
Le tampon d'échantillonnage agit comme une éponge et retient un excès de liquide d'échantillonnage. Une fois imbibé, le liquide s'écoule vers le deuxième tampon de conjugaison, dans lequel le fabricant a stocké des particules bioactives lyophilisées appelées conjugués (voir ci-dessous) dans une matrice sel-sucre. Le tampon de conjugaison contient tous les réactifs nécessaires à une réaction chimique optimisée entre la molécule cible (par exemple, un antigène) et son partenaire chimique (par exemple, un anticorps) qui a été immobilisé à la surface de la particule. Ces marques ciblent les particules lorsqu'elles traversent le tampon et se poursuivent jusqu'aux lignes de test et de contrôle. La ligne de test affiche un signal, souvent une couleur, comme dans les tests de grossesse. La ligne de contrôle contient des ligands d'affinité qui indiquent si l'échantillon a traversé et si les biomolécules du tampon conjugué sont actives. Après avoir traversé ces zones de réaction, le liquide pénètre dans le matériau poreux final, la mèche, qui sert simplement de conteneur à déchets.
Ilexiste deux types de LFT : la méthode directe et la méthode concurrentielle.
La méthode directe (sandwich) utilise un conjugué anticorps-étiquette fixé sur une membrane conjuguée. Des anticorps spécifiques à cet analyte sont immobilisés sur la ligne de test, et des anticorps anti-espèces spécifiques aux anticorps primaires sont immobilisés sur la ligne de contrôle. Lorsque l'échantillon, qui contient une substance analysée, est appliqué sur la bande de test et que cet échantillon touche la membrane avec le conjugué, l'analyte se lie au conjugué AT-tag. Le complexe immunitaire pénètre ensuite dans la zone de test, où il se lie à des anticorps spécifiques, formant un "sandwich" Ab-Ag-Ab-tag. L'excès de conjugué non lié se lie aux anticorps anti-espèces sur la ligne de contrôle. Par conséquent, 2 lignes sur la bande de test constituent un résultat positif. Si l'échantillonne contientpas de substance analysée, le conjugué se lie aux anticorps anti-espèces uniquement sur la ligne de contrôle, formant une seule ligne sur la bandelette de test. La méthode LFT directe est utilisée pour détecter les composés de poids moléculaire élevé - virus, y compris le VIH, diverses hormones (par exemple, dans les tests de grossesse), les agents pathogènes des maladies infectieuses.
La méthodeLFT compétitive utilisée pour la détermination des composés de faible poids moléculaire est basée sur la compétition entre l'analyte et le conjugué analyte immobilisé:protéine porteuse pour un nombre limité de sites de liaison pour les anticorps spécifiques contenus dans le conjugué Ab-tag. Lorsqu'un échantillon contenant l'analyte est appliqué, il se lie au conjugué AT-tag sur la membrane du conjugué. Le complexe immunitaire traverse ensuite la zone de test, où le conjugué analyte/protéine porteuse est immobilisé. L'immunocomplexe ne peut pas se lier à ce conjugué en raison d'obstacles stériques : les composés de faible poids moléculaire ont généralement un seul déterminant antigénique et, par conséquent, les anticorps ont un seul site de liaison à l'antigène, qui est déjà occupé par l'analyte. Ensuite, le complexe immun est lié par des anticorps anti-espèces sur la ligne de contrôle. En conséquence, l'absence de bande colorée dans la zone de test et la présence d'une couleur dans la zone de contrôle indiquent que la concentration de l'analyte dans l'échantillon testé dépasse sa valeur seuil pour ce test.
S'il n'y a pas d'analyte dans l'échantillon, le conjugué Ab-tag se lie au conjugué Ag:protéine porteuse immobilisé dans la zone de la ligne de test. Le conjugué Ab-tag non lié entre dans la zone de la ligne de contrôle et s'y lie avec les anticorps anti-espèces. Ainsi, la présence de deux lignes colorées (test et contrôle) est un résultat d'analyse négatif.
Le format LFT compétitif est utilisé pour détecter les composés de faible poids moléculaire, y compris les métabolites des composés narcotiques dans l'urine, le liquide buccal et les extraits de tissus.
La méthodeLFT compétitive utilisée pour la détermination des composés de faible poids moléculaire est basée sur la compétition entre l'analyte et le conjugué analyte immobilisé:protéine porteuse pour un nombre limité de sites de liaison pour les anticorps spécifiques contenus dans le conjugué Ab-tag. Lorsqu'un échantillon contenant l'analyte est appliqué, il se lie au conjugué AT-tag sur la membrane du conjugué. Le complexe immunitaire traverse ensuite la zone de test, où le conjugué analyte/protéine porteuse est immobilisé. L'immunocomplexe ne peut pas se lier à ce conjugué en raison d'obstacles stériques : les composés de faible poids moléculaire ont généralement un seul déterminant antigénique et, par conséquent, les anticorps ont un seul site de liaison à l'antigène, qui est déjà occupé par l'analyte. Ensuite, le complexe immun est lié par des anticorps anti-espèces sur la ligne de contrôle. En conséquence, l'absence de bande colorée dans la zone de test et la présence d'une couleur dans la zone de contrôle indiquent que la concentration de l'analyte dans l'échantillon testé dépasse sa valeur seuil pour ce test.
S'il n'y a pas d'analyte dans l'échantillon, le conjugué Ab-tag se lie au conjugué Ag:protéine porteuse immobilisé dans la zone de la ligne de test. Le conjugué Ab-tag non lié entre dans la zone de la ligne de contrôle et s'y lie avec les anticorps anti-espèces. Ainsi, la présence de deux lignes colorées (test et contrôle) est un résultat d'analyse négatif.
Le format LFT compétitif est utilisé pour détecter les composés de faible poids moléculaire, y compris les métabolites des composés narcotiques dans l'urine, le liquide buccal et les extraits de tissus.
Explication plus simple.
Si vous ne comprenez pas, je vais vous expliquer plus simplement. Au début de chaque bandelette de test se trouvent des anticorps marqués. En raison de la structure de la bandelette, l'urine se répand le long de celle-ci, transportant les complexes résultants dans la zone de test, où les ligaments médicament-protéine sont fixés. Étant donné que l'anticorps du complexe immun arrivé est déjà absorbé par le médicament présent dans l'urine, il ne peut pas se fixer dans la zone de test et se déplace vers la zone de contrôle, où il se lie à l'anticorps anti-espèce, colorant ainsi une bande sur l'échelle (résultat positif).
S'il n'y a pas de drogue dans l'échantillon biologique, les anticorps se déplacent dans l'urine le long de la bande de test, restant libres. Lorsque le complexe anticorps-protéine se rencontre dans la zone de test, certains anticorps marqués s'y fixent (la première bande apparaît), le reste se déplace avec le flux d'urine dans la zone de contrôle, où il se fixe également à l'anticorps antispécifique, colorant la deuxième bande (2 bandes - résultat négatif). Si la ligne apparaît dans la zone de test mais n'apparaît pas dans la zone de contrôle (elle devrait toujours apparaître), le test est défectueux.
S'il n'y a pas de drogue dans l'échantillon biologique, les anticorps se déplacent dans l'urine le long de la bande de test, restant libres. Lorsque le complexe anticorps-protéine se rencontre dans la zone de test, certains anticorps marqués s'y fixent (la première bande apparaît), le reste se déplace avec le flux d'urine dans la zone de contrôle, où il se fixe également à l'anticorps antispécifique, colorant la deuxième bande (2 bandes - résultat négatif). Si la ligne apparaît dans la zone de test mais n'apparaît pas dans la zone de contrôle (elle devrait toujours apparaître), le test est défectueux.
Les substances ont été utilisées par des volontaires qui n'ont pris aucune substance psychoactive pendant une période de temps suffisante, l'urine a été prélevée pour leur analyse. Voici les résultats de l'expérience.
Expériences.
AMPHÉTAMINEPrincipaux métabolites : amphétamine, 4-hydroxyamphétamine, 4-hydroxynorephedrine, 4-hydroxyphénylacétone, acide benzoïque, acide hippurique, noréphédrine, phénylacétone.
.
COCAINE.
Principaux métabolites : benzoylecgonine, ecgonine methyl ester, ecgonine, norcocaïne, p-hydroxycaïne, m-hydroxycaïne, p-hydroxybenzoylecgonine, m-hydroxybenzoylecgonine.
Si vous regardez le test de droite, vous pouvez voir pourquoi les bandelettes réactives doivent être manipulées d'un point de vue critique. La personne testée n'a pas consommé récemment de PAS, à l'exception de la cocaïne.
HÉROÏNE.
Principaux métabolites : morphine, normorphine, hydromorphone.
MDMA / ECSTASY.
Principaux métabolites : 3,4-méthylènedioxyméthamphétamine (MDMA), 3,4-méthylènedioxyamphétamine (MDA), 4-hydroxy-3-méthoxyméthamphétamine (HMMA), 4-hydroxy-3-méthoxyamphétamine (HMA).
Il existe des bandelettes de test pour la MDMA / Ecstasy, mais elles sont plus difficiles à trouver. L'amphétamine et la méthamphétamine ont été trouvées dans l'urine. Cela s'explique par leur appartenance commune à la même classe et, par conséquent, par la similitude structurelle des substances et de leurs métabolites. Les échelles THC (cannabinoïdes) et OPI (opiacés) du deuxième test ne participent pas à l'expérience (non activées). D'après la photo de gauche, ces substances ne sont pas détectées en relation avec la consommation de MDMA.
MEPHEDRONE.
Principaux métabolites : méphédrone, nor-méphédrone, 4'-carboxy-méphédrone, 1'-dihydro-méphédrone, N-succinyl-nor-méphédrone.
Un commentaire intéressant des éditeurs du site https://www.zoomtesting.co.uk: "Certains vendeurs soulignent qu'un test de méthamphétamine peut être utilisé pour détecter la méphédrone. Cette affirmation est toutefois erronée. La structure chimique de la méthamphétamine et de la méphédrone est différente, de sorte que le test de méthamphétamine n'est pas valable pour la méphédrone". Eh bien, vérifions.
Outre les substances standard, une autre bandelette a été utilisée pour tester les barbituriques. Il y a manifestement quelque chose qui ne va pas avec cette bandelette. Le test a été répété par un autre volontaire qui n'avait jamais consommé de barbituriques ou de préparations en contenant, avec un résultat similaire.
ALPHA-PVP (alpha-pyrrolidinovalerophenone).
La deuxième ligne de la fenêtre PCP est presque totalement absente.
MARIJUANA.
Principaux métabolites : tétrahydrocannabinol (THC), 11-hydroxy-THC, 11-nor-9-carboxy-THC. Le cannabis bien déterminé et toujours dans sa seule fenêtre "THC" (tétrahydrocannabinol), il suffit de le démontrer sur le test le plus simple.
Conclusion.
Les tests permettent de détecter les drogues dans les fluides corporels depuis bien plus longtemps que leur effet psychoactif ne se fait sentir. Ils sont peu coûteux, ont une bonne sensibilité et ne sont que marginalement inférieurs aux méthodes utilisées en laboratoire. N'oubliez pas votre sécurité : si vous devez vérifier vous-même votre "propreté", les tests express seront indispensables.
Last edited by a moderator: