Question Mistä ostaa geeninäytteitä itselleni testausta varten?

[jvfuyfutfoytf87t]

Haluan käyttää Crispr-geeniterapiaa itselläni, mutta Odin-sivustolla myydään vain bakteereilla leikkimiseen tarkoitettuja sarjoja. Mistä voin ostaa hyödyllisiä geenejä?

 

[archae]

Crispr-menetelmät, vaikka ne ovatkin hyödyllisiä ja hyvin helppokäyttöisiä aloittelijoille, ovat silti hyvin monimutkaisia. Onko sinulla kokemusta synteettisestä biologiasta? Tunnetko geenissä olevat eri osatekijät, jotka määrittävät sen voimakkuuden ja olosuhteet, joissa se ilmentyy? Mitä tiedät geneettisestä koodista, kodonien optimoinnista, alukkeiden suunnittelusta, kloonaus- ja ekspressiovektoreista, CRISPR-Cas9-kompleksin rakenteesta? Nämä eivät ole sattumanvaraisia sanoja, vaan ne kaikki ovat käsitteitä, jotka sinun on hallittava täysin ennen kuin onnistut transfektoimaan nisäkässolun, saati oman solusi, onnistuneesti.

Saadaksesi haluamasi geenin sinun on ensin löydettävä sen sekvenssi geenitietokannasta, mikä on hyvin helppoa ja vapaasti saatavilla verkossa, sekä sopiva promoottori, liimattava nämä kaksi elementtiä yhteen sekä PCR-alukkeet (restriktiokohdilla restriktioentsyymien pilkkomista varten) ja lähetettävä tämä räätälöityyn DNA-synteesiin erikoistuneelle yritykselle. Niitä on useita, jotkut ovat paljon halvempia kuin toiset.

Muuten voit ostaa vain promoottori-juosteen ja saada kiinnostavan geenisi PCR:llä luonnollisesta lähteestä tai ostaa geenin suoraan, jos se on yleinen, kuten luciferaasi-järjestelmä (mutta miksi haluaisit hehkua pimeässä lol).

Sitten voit lisätä tämän CRISPR-plasmidiin sekä sopivan opasjuosteen kohdistaaksesi sen tiettyyn paikkaan genomissa.

Voit katsoa youtube-kanavalta "the thought emporium", joka teki tällaisen kokeen itselleen, mutta KYSYTÄÄN, että tutkitkaa hankettanne vähintään muutaman vuoden ajan ennen kuin ryhdytte toteuttamaan sitä.

 

[jvfuyfutfoytf87t]

Kiitos vastauksesta. En ole vielä perehtynyt, mutta olen hankkinut viime aikoina monia genetiikkaa ja Crispriä käsitteleviä kirjoja. Onko olemassa näihin aiheisiin keskittyvää syvällistä verkkofoorumia? Tämä oli lähin, jonka löysin.

 

[archae]

No ei tietääkseni. En valitettavasti voi lähettää sinulle mitään ei-julkista tietoa ilman, että doxaan itseni, mutta jos aiot tutkia sitä kunnolla, anna mennä vain, ja voit vapaasti lähettää minulle PM:n tänne milloin tahansa, jos sinulla on kysyttävää.
Tämäntyyppisissä asioissa selkeä verkko on luultavasti paras paikka, olen melko varma, että tiedemies on jo vastannut kaikkiin kysymyksiisi tavalla tai toisella. Vielä kerran, jos sinulla on lisää kysymyksiä, älä epäröi lähettää minulle PM:ää!