Johdanto.
Tämän tutkimuksen päätavoitteena on arvioida mahdollisuutta määrittää tärkeimmät lääkkeet biologisissa nesteissä julkisesti saatavilla olevilla ekspressiivisillä menetelmillä kotona. Tässä artikkelissa vastataan seuraaviin kysymyksiin.
- Paljastavatko apteekkitestit 3-20 dollaria todella sen, että ilmoitettuja aineita käytetään? (Klassiset yhdistetyt testiliuskat sisältävät asteikot amfetamiinin, metamfetamiinin, kokaiinin, marihuanan ja opiaattien määrittämiseksi).
- Voisivatko nämä testiliuskat olla käyttökelpoisia alfa-PVP:n ja mefedronin osalta? (Apteekeissa ei ole erikoistuneita testejä).
Yleisimpiä apteekkitestejä, joita on helppo ostaa, käytetään siksi, että tutkimuksesta on hyötyä ja että sitä voidaan soveltaa käytännössä.
Tärkeää: voidaan käyttää myös muita lateraalivirtaustestejä (LFT), joilla on eri merkinnät, mutta valmistajalla ei ole väliä, koska kaikissa testipakkauksissa on sama toimintamekanismi ja vertailukelpoinen tehokkuus.
Tietoja LFT:stä.
Lateraalivirtaustestit (LFT), jotka tunnetaan myös nimellä lateraalivirtausimmunokromatografiset määritykset tai pikatestit, ovat yksinkertaisia laitteita, joiden tarkoituksena on havaita kohdeaineen läsnäolo nestemäisessä näytteessä ilman, että tarvitaan erikoistuneita ja kalliita laitteita. Näitä testejä käytetään laajalti lääketieteellisessä diagnostiikassa kotitesteissä, hoitopaikkatesteissä tai laboratoriokäytössä. Esimerkiksi kotiraskaustesti on LFT, joka havaitsee tietyn hormonin. Nämä testit ovat yksinkertaisia ja taloudellisia, ja ne antavat tuloksen yleensä noin viidestä 30 minuutissa. Monet laboratoriosovellukset lisäävät yksinkertaisten LFT-testien herkkyyttä käyttämällä erityisiä lisälaitteita.
LFT-testit toimivat samoilla periaatteilla kuin entsyymisidonnaiset immunosorbenttimääritykset (ELISA). Pohjimmiltaan näissä testeissä nestemäinen näyte ajetaan pitkin tyynyn pintaa, jossa on reaktiivisia molekyylejä, jotka näyttävät positiivisen tai negatiivisen tuloksen. Tyynyt perustuvat kapillaarivuoteisiin, kuten huokoiseen paperiin, mikrorakenteiseen polymeeriin tai sintrattuun polymeeriin. Jokainen näistä tyynyistä pystyy kuljettamaan nestettä (esim. virtsaa, verta, sylkeä) spontaanisti.
Näytetyyny toimii sienenä ja pidättää ylimääräisen näytteen nesteen. Kun neste on imeytynyt, se virtaa toiseen konjugaattityynyyn, johon valmistaja on varastoinut suola-sokerimatriisiin pakastekuivattuja bioaktiivisia hiukkasia, joita kutsutaan konjugaateiksi (ks. jäljempänä). Konjugaattityyny sisältää kaikki reagenssit, joita tarvitaan optimoituun kemialliseen reaktioon kohdemolekyylin (esim. antigeenin) ja sen kemiallisen kumppanin (esim. vasta-aineen) välillä, joka on immobilisoitu hiukkasen pinnalle. Nämä merkit merkitsevät kohdehiukkasia, kun ne kulkevat tyynyn läpi ja jatkavat matkaansa testi- ja kontrollilinjoille. Testiviivalla näkyy signaali, usein väri, kuten raskaustestissä. Kontrolliviiva sisältää affiniteettiligandeja, jotka osoittavat, onko näyte virrannut läpi ja ovatko konjugaattityynyssä olevat biomolekyylit aktiivisia. Kun neste on läpäissyt nämä reaktiovyöhykkeet, se pääsee viimeiseen huokoiseen materiaaliin, sydänlankaan, joka toimii yksinkertaisesti jätesäiliönä.
LFT-testit toimivat samoilla periaatteilla kuin entsyymisidonnaiset immunosorbenttimääritykset (ELISA). Pohjimmiltaan näissä testeissä nestemäinen näyte ajetaan pitkin tyynyn pintaa, jossa on reaktiivisia molekyylejä, jotka näyttävät positiivisen tai negatiivisen tuloksen. Tyynyt perustuvat kapillaarivuoteisiin, kuten huokoiseen paperiin, mikrorakenteiseen polymeeriin tai sintrattuun polymeeriin. Jokainen näistä tyynyistä pystyy kuljettamaan nestettä (esim. virtsaa, verta, sylkeä) spontaanisti.
Näytetyyny toimii sienenä ja pidättää ylimääräisen näytteen nesteen. Kun neste on imeytynyt, se virtaa toiseen konjugaattityynyyn, johon valmistaja on varastoinut suola-sokerimatriisiin pakastekuivattuja bioaktiivisia hiukkasia, joita kutsutaan konjugaateiksi (ks. jäljempänä). Konjugaattityyny sisältää kaikki reagenssit, joita tarvitaan optimoituun kemialliseen reaktioon kohdemolekyylin (esim. antigeenin) ja sen kemiallisen kumppanin (esim. vasta-aineen) välillä, joka on immobilisoitu hiukkasen pinnalle. Nämä merkit merkitsevät kohdehiukkasia, kun ne kulkevat tyynyn läpi ja jatkavat matkaansa testi- ja kontrollilinjoille. Testiviivalla näkyy signaali, usein väri, kuten raskaustestissä. Kontrolliviiva sisältää affiniteettiligandeja, jotka osoittavat, onko näyte virrannut läpi ja ovatko konjugaattityynyssä olevat biomolekyylit aktiivisia. Kun neste on läpäissyt nämä reaktiovyöhykkeet, se pääsee viimeiseen huokoiseen materiaaliin, sydänlankaan, joka toimii yksinkertaisesti jätesäiliönä.
LFT-tyyppejä on kaksi: suora ja kilpaileva menetelmä.
Suorassa (sandwich-) LFT:s sä käytetään vasta-aine-tagikonjugaattia, joka on kiinnitetty konjugaattikalvoon. Tälle analyytille spesifiset vasta-aineet on immobilisoitu testiriville ja primaarivasta-aineille spesifiset anti-laji vasta-aineet on immobilisoitu kontrolliriville. Kun analysoitavaa ainetta sisältävä näyte levitetään testiliuskalle ja tämä näyte osuu konjugaattikalvoon, analyytti sitoutuu AT-tagikonjugaattiin. Sitten immuunikompleksi siirtyy testivyöhykkeelle, jossa se sitoutuu spesifisiin vasta-aineisiin muodostaen "sandwichin" Ab-Ag-Ab-tag. Sitoutumattoman konjugaatin ylijäämä sitoutuu kontrollilinjalla oleviin lajinvasta-aineisiin. Näin ollen 2 viivaa testiliuskalla on positiivinen testitulos. Jos näytteessäei ole analysoitavaa ainetta, konjugaatti sitoutuu vasta-aineisiin vain kontrolliviivalla, jolloin testiliuskaan muodostuu yksi viiva. Suoraa LFT-menetelmää käytetään korkean molekyylipainon yhdisteiden - virusten, kuten HIV:n, erilaisten hormonien (esimerkiksi raskaustestissä) ja tartuntatautien taudinaiheuttajien - havaitsemiseen.
Kompetitiivinen LFT-menetelmä, jota käytetään pienimolekyylipainoisten yhdisteiden määrittämiseen, perustuu analyytin ja immobilisoidun analyytti-kantajaproteiinikonjugaatin väliseen kilpailuun Ab-tag-konjugaatin sisältämien spesifisten vasta-aineiden rajallisesta määrästä sitoutumiskohtia. Kun analyyttiä sisältävä näyte annostellaan, se sitoutuu AT-tag-konjugaattiin konjugaattikalvolla. Sitten immuunikompleksi kulkee testivyöhykkeen läpi, jossa analyytti:kantajaproteiinikonjugaatti on immobilisoitu. Immuunikompleksi ei voi sitoutua tähän konjugaattiin steeristen esteiden vuoksi: pienimolekyylipainoisilla yhdisteillä on yleensä yksi antigeeninen determinantti, ja vastaavasti vasta-aineilla on yksi antigeenin sitoutumiskohta, jonka analyytti on jo miehittänyt. Seuraavaksi immuunikompleksiin sitoutuu kontrollilinjan anti-lajien vasta-aineita. Tämän seurauksena värillisen kaistan puuttuminen testivyöhykkeellä ja värin esiintyminen kontrollivyöhykkeellä osoittaa, että analyytin pitoisuus testinäytteessä ylittää tässä testissä käytettävän kynnysarvon.
Jos näytteessä ei ole analyyttiä, Ab-tag-konjugaatti sitoutuu Ag:kantajaproteiinikonjugaattiin, joka on immobilisoitu testilinjan vyöhykkeelle. Sitoutumaton Ab-tag-konjugaatti siirtyy kontrollilinjan vyöhykkeelle ja sitoutuu siellä lajin vasta-aineisiin. Näin ollen kahden värillisen viivan (testi- ja kontrolliviiva) esiintyminen on negatiivinen analyysitulos.
Kompetitiivista LFT-muotoa käytetään matalan molekyylipainon yhdisteiden, mukaan lukien huumausaineiden metaboliitit, havaitsemiseen virtsasta, suunesteestä ja kudosuutteista.
Kompetitiivinen LFT-menetelmä, jota käytetään pienimolekyylipainoisten yhdisteiden määrittämiseen, perustuu analyytin ja immobilisoidun analyytti-kantajaproteiinikonjugaatin väliseen kilpailuun Ab-tag-konjugaatin sisältämien spesifisten vasta-aineiden rajallisesta määrästä sitoutumiskohtia. Kun analyyttiä sisältävä näyte annostellaan, se sitoutuu AT-tag-konjugaattiin konjugaattikalvolla. Sitten immuunikompleksi kulkee testivyöhykkeen läpi, jossa analyytti:kantajaproteiinikonjugaatti on immobilisoitu. Immuunikompleksi ei voi sitoutua tähän konjugaattiin steeristen esteiden vuoksi: pienimolekyylipainoisilla yhdisteillä on yleensä yksi antigeeninen determinantti, ja vastaavasti vasta-aineilla on yksi antigeenin sitoutumiskohta, jonka analyytti on jo miehittänyt. Seuraavaksi immuunikompleksiin sitoutuu kontrollilinjan anti-lajien vasta-aineita. Tämän seurauksena värillisen kaistan puuttuminen testivyöhykkeellä ja värin esiintyminen kontrollivyöhykkeellä osoittaa, että analyytin pitoisuus testinäytteessä ylittää tässä testissä käytettävän kynnysarvon.
Jos näytteessä ei ole analyyttiä, Ab-tag-konjugaatti sitoutuu Ag:kantajaproteiinikonjugaattiin, joka on immobilisoitu testilinjan vyöhykkeelle. Sitoutumaton Ab-tag-konjugaatti siirtyy kontrollilinjan vyöhykkeelle ja sitoutuu siellä lajin vasta-aineisiin. Näin ollen kahden värillisen viivan (testi- ja kontrolliviiva) esiintyminen on negatiivinen analyysitulos.
Kompetitiivista LFT-muotoa käytetään matalan molekyylipainon yhdisteiden, mukaan lukien huumausaineiden metaboliitit, havaitsemiseen virtsasta, suunesteestä ja kudosuutteista.
Yksinkertaisempi selitys.
Jos et ymmärrä, selitän yksinkertaisemmin. Jokaisen testiliuskan alussa on merkittyjä vasta-aineita. Testiliuskan rakenteen vuoksi virtsa leviää sitä pitkin ja kuljettaa syntyneet kompleksit testialueelle, jossa lääkeaine-proteiinisiteet kiinnittyvät. Koska saapuneesta immuunikompleksista peräisin oleva vasta-aine on jo ottanut huumausaineen virtsasta, se ei voi kiinnittyä testialueelle, vaan siirtyy edelleen kontrollialueelle, jossa se sitoutuu lajinvastaiseen vasta-aineeseen ja värjää yhden liuskan asteikolla (positiivinen tulos).
Jos biotestinäytteessä ei ole huumausainetta, vasta-aineet liikkuvat virtsassa testiliuskaa pitkin ja jäävät vapaiksi. Kun vasta-aine-proteiinikompleksi kohtaa testialueella, osa leimatuista vasta-aineista kiinnittyy siihen (ensimmäinen liuska näkyy), loput liikkuvat virtsan virtausvirran mukana kontrollialueelle, jossa ne myös sitoutuvat lajinvastaiseen vasta-aineeseen, jolloin toinen liuska korostuu (2 liuskaa - negatiivinen tulos). Jos viiva näkyy testialueella, mutta ei näy kontrollialueella (sen pitäisi aina näkyä) - testi on virheellinen.
Jos biotestinäytteessä ei ole huumausainetta, vasta-aineet liikkuvat virtsassa testiliuskaa pitkin ja jäävät vapaiksi. Kun vasta-aine-proteiinikompleksi kohtaa testialueella, osa leimatuista vasta-aineista kiinnittyy siihen (ensimmäinen liuska näkyy), loput liikkuvat virtsan virtausvirran mukana kontrollialueelle, jossa ne myös sitoutuvat lajinvastaiseen vasta-aineeseen, jolloin toinen liuska korostuu (2 liuskaa - negatiivinen tulos). Jos viiva näkyy testialueella, mutta ei näy kontrollialueella (sen pitäisi aina näkyä) - testi on virheellinen.
Aineita käyttivät vapaaehtoiset, jotka eivät käyttäneet mitään psykoaktiivisia aineita riittävän pitkään, virtsa otettiin niiden analysointia varten. Tässä ovat kokeen tulokset.
Kokeet.
AMFETAMIINITärkeimmät aineenvaihduntatuotteet: amfetamiini, 4-hydroksiamfetamiini, 4-hydroksinorefedriini, 4-hydroksifenyyliasetoni, bentsoehappo, hippurihappo, norefedriini, fenyyliasetoni.
KOKAINE.
Tärkeimmät aineenvaihduntatuotteet: bentsoylokgoniini, ekgoniinimetyyliesteri, ekgoniini, norokokaiini, p-hydroksikaiini, m-hydroksikaiini, p-hydroksibentsoylokgoniini, m-hydroksibentsoylokgoniini.
Jos katsot oikealla olevaa testiä, näet, miksi testiliuskoja on käsiteltävä kriittisesti. Testattu henkilö ei ole äskettäin käyttänyt mitään PAS:ää, paitsi kokaiinia.
HEROIINI.
Tärkeimmät aineenvaihduntatuotteet: morfiini, normorfiini, hydromorfoni.
MDMA / EKSTAASI.
Tärkeimmät aineenvaihduntatuotteet: 3,4-metyleenidioksimetamfetamiini (MDMA), 3,4-metyleenidioksimetamfetamiini (MDA), 4-hydroksi-3-metoksimetamfetamiini (HMMA), 4-hydroksi-3-metoksiamfetamiini (HMA).
Saatavilla on MDMA/Ecstasy-testiliuskoja, mutta niitä on vaikeampi löytää. Virtsasta löytyi amfetamiinia ja metamfetamiinia. Tämä selittyy niiden yhteisellä kuulumisella samaan luokkaan ja vastaavasti aineiden ja niiden aineenvaihduntatuotteiden rakenteellisella samankaltaisuudella. THC (kannabinoidit) ja OPI (opiaatit) -asteikot toisessa testissä eivät osallistu kokeeseen (ei aktivoitu). Vasemman kuvan mukaan näitä aineita ei havaita MDMA:n käytön yhteydessä.
MEPHEDRONE.
Tärkeimmät aineenvaihduntatuotteet: mefedroni, nor-mefedroni, 4'-karboksi-mefedroni, 1'-dihydro-mefedroni, N-succinyl-nor-mefedroni.
Mielenkiintoinen kommentti sivuston https://www.zoomtesting.co.uk toimittajilta :"Jotkut myyjät huomauttavat, että metamfetamiinitestiä voidaan käyttää mefedronin havaitsemiseen. Tämä on kuitenkin väärin. Metamfetamiinin ja mefedronin kemiallinen rakenne on erilainen, joten metamfetamiinitesti ei kelpaa mefedronille". No, tarkistetaanpa asia.
Standardiaineiden lisäksi käytettiin vielä yhtä testiliuskaa barbituraattien testaamiseen. Tässä testiliuskassa on selvästi jotain vikaa. Testi toistettiin toisella vapaaehtoisella, joka ei ollut koskaan käyttänyt barbituraatteja tai niitä sisältäviä valmisteita, ja tulos oli samanlainen.
ALPHA-PVP (alfa-pyrrolidinovalerofenoni).
PCP-ikkunan toinen viiva puuttuu lähes kokonaan.
MARIJUANA.
Tärkeimmät aineenvaihduntatuotteet: tetrahydrokannabinoli (THC), 11-hydroksi-THC, 11-nor-9-karboksi-THC. Kannabis hyvin määritetty ja aina vain sen ikkunassa "THC" (tetrahydrokannabinoli), se riittää osoittamaan yksinkertaisimmalla testillä.
Johtopäätös.
Testeissä on havaittu huumeita kehon nesteistä paljon kauemmin kuin sen psykoaktiivinen vaikutus on tuntunut. Ne ovat melko halpoja, niillä on hyvä herkkyys ja ne ovat vain vähän huonompia kuin laboratoriossa käytettävät menetelmät. Muista turvallisuutesi - jos on tarve tarkistaa "puhtautesi" itse, pikatestit ovat välttämättömiä.
Last edited by a moderator: