Sissejuhatus.
Käesoleva uurimistöö peamine eesmärk on hinnata võimalust määrata peamisi ravimeid bioloogilistes vedelikes avalikult kättesaadavate ekspressmeetoditega kodus. Käesolev artikkel vastab järgmistele küsimustele.
- Kas apteegitestid 3-20 dollarit näitavad tõesti deklareeritud ainete kasutamise fakti? (Klassikalised kombineeritud testribad sisaldavad skaalasid amfetamiini, metamfetamiini, kokaiini, marihuaana, opiaatide määramiseks).
- Kas need testribad võiksid olla kasulikud alfa-PVP ja mefedrooni jaoks? (Apteekides ei ole spetsiaalseid teste).
Põhjus, miks kasutatakse kõige tavalisemaid apteegitestid, mida on lihtne osta, on see, et uuring peaks olema kasulik ja praktilise rakendusega.
Tähtis: võib kasutada ka teisi külgvoolutestide (LFT) komplekte, millel on erinevad sildid, tootjafirma ei ole oluline, sest igal testikomplektil on sama töömehhanism ja võrreldav tõhusus.
LFT kohta.
Külgvoolutestid (LFT), mida nimetatakse ka külgvoolu-immuunkromatograafilisteks testideks või kiirtestideks, on lihtsad seadmed, mille eesmärk on tuvastada sihtaine olemasolu vedelas proovis ilma spetsiaalsete ja kulukate seadmeteta. Neid teste kasutatakse laialdaselt meditsiinidiagnostikas koduseks testimiseks, hoolduspunktis või laboratooriumis. Näiteks kodune rasedustest on LFT, mis tuvastab konkreetse hormooni. Need testid on lihtsad, ökonoomsed ja näitavad tulemusi tavaliselt umbes viie kuni 30 minutiga. Paljud laboratoorsed rakendused suurendavad lihtsate LFTde tundlikkust, kasutades selleks spetsiaalseid lisaseadmeid.
LFT-d töötavad samadel põhimõtetel kui ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsid (ELISA). Sisuliselt jooksevad need testid vedelikuprooviga mööda padjakese pinda koos reaktiivsete molekulidega, mis annavad visuaalselt positiivse või negatiivse tulemuse. Tampoonid põhinevad kapillaarkihilidel, näiteks poorse paberi, mikrostruktuuriga polümeeri või paagutatud polümeeri tükkidel. Iga selline padjake on võimeline vedelik (nt uriin, veri, sülg) spontaanselt transportima.
Proovipadi toimib nagu käsn ja hoiab kinni liigse proovivedeliku. Kui vedelik on imbunud, voolab see teise konjugaatpadjandisse, kuhu tootja on salvestanud külmkuivatatud bioaktiivsed osakesed, mida nimetatakse konjugaatideks (vt allpool), sool-suhkru maatriksis. Konjugaatpad sisaldab kõiki reagente, mis on vajalikud optimeeritud keemiliseks reaktsiooniks sihtmolekuli (nt antigeeni) ja selle keemilise partneri (nt antikeha) vahel, mis on immobiliseeritud osakese pinnale. Need märgistavad sihtmärgi osakesed, kui nad läbivad pad'i ja jätkavad üle katse- ja kontrolljoonte. Katseliin näitab signaali, sageli värvi, nagu rasedustestides. Kontrolljoon sisaldab afiinsusligante, mis näitavad, kas proov on läbi voolanud ja kas konjugaatpadjal olevad biomolekulid on aktiivsed. Pärast nende reaktsioonitsoonide läbimist siseneb vedelik viimasesse poorsesse materjali, nõelasse, mis toimib lihtsalt jäätmekonteinerina.
LFT-d töötavad samadel põhimõtetel kui ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsid (ELISA). Sisuliselt jooksevad need testid vedelikuprooviga mööda padjakese pinda koos reaktiivsete molekulidega, mis annavad visuaalselt positiivse või negatiivse tulemuse. Tampoonid põhinevad kapillaarkihilidel, näiteks poorse paberi, mikrostruktuuriga polümeeri või paagutatud polümeeri tükkidel. Iga selline padjake on võimeline vedelik (nt uriin, veri, sülg) spontaanselt transportima.
Proovipadi toimib nagu käsn ja hoiab kinni liigse proovivedeliku. Kui vedelik on imbunud, voolab see teise konjugaatpadjandisse, kuhu tootja on salvestanud külmkuivatatud bioaktiivsed osakesed, mida nimetatakse konjugaatideks (vt allpool), sool-suhkru maatriksis. Konjugaatpad sisaldab kõiki reagente, mis on vajalikud optimeeritud keemiliseks reaktsiooniks sihtmolekuli (nt antigeeni) ja selle keemilise partneri (nt antikeha) vahel, mis on immobiliseeritud osakese pinnale. Need märgistavad sihtmärgi osakesed, kui nad läbivad pad'i ja jätkavad üle katse- ja kontrolljoonte. Katseliin näitab signaali, sageli värvi, nagu rasedustestides. Kontrolljoon sisaldab afiinsusligante, mis näitavad, kas proov on läbi voolanud ja kas konjugaatpadjal olevad biomolekulid on aktiivsed. Pärast nende reaktsioonitsoonide läbimist siseneb vedelik viimasesse poorsesse materjali, nõelasse, mis toimib lihtsalt jäätmekonteinerina.
On olemas kaks LFT tüüpi: otsene ja konkureeriv meetod.
Otsese (sandwich) LFT puhul kasutatakse antikeha-konjugaati, mis on kantud konjugaatmembraanile. Antikehad, mis on spetsiifilised sellele analüüdile, on immobiliseeritud katseliinile ja antiliigilised antikehad, mis on spetsiifilised primaarsetele antikehadele, on immobiliseeritud kontrolliliinile. Kui analüüsitavat ainet sisaldav proov kantakse testribale ja see proov satub konjugaatmembraanile, seondub analüüdi AT-tag konjugaadiga. Seejärel siseneb immuunkompleks testivööndisse, kus see seondub spetsiifiliste antikehadega, moodustades "võileiva" Ab-Ag-Ab-tag. Mittesidunud konjugaadi ülejääk seondub kontrolljoonel olevate antikehadega. Seetõttu on 2 joont testribal positiivne testitulemus. Kui proovisei ole analüüsitavat ainet, seondub konjugaat anti-liigi antikehadega ainult kontrolljoonel, moodustades testribal ühe joone. Otsest LFT-meetodit kasutatakse suure molekulmassiga ühendite - viiruste, sealhulgas HIV; erinevate hormoonide (näiteks rasedustestides), nakkushaiguste patogeenide - avastamiseks.
Konkurentsiaalne LFT-meetod, mida kasutatakse madala molekulmassiga ühendite määramiseks, põhineb analüüdi ja immobiliseeritud analüüdi-kandevalkukonjugaadi vahelisel konkurentsil piiratud arvu sidumiskohtade pärast, mis on seotud Ab-tag-konjugaadis sisalduvate spetsiifiliste antikehadega. Kui analüüsitavat ainet sisaldavat proovi manustatakse, seondub see AT-tag-konjugaadiga konjugaatmembraanil. Seejärel läbib immuunkompleks testitsooni, kus analüüdi:kandevalku konjugaat on immobiliseeritud. Immunkompleks ei saa selle konjugaadiga seonduda steroorsete takistuste tõttu: madala molekulmassiga ühenditel on tavaliselt üks antigeenne determinant ja vastavalt sellele on antikehadel üks antigeeni sidumiskoht, mille analüüt juba hõivab. Järgnevalt seovad immuunkompleksi antiliigivastased antikehad kontrolljoonel. Selle tulemusena näitab värvilise riba puudumine testitsoonis ja värvi olemasolu kontrolltsoonis, et analüüdi kontsentratsioon uuritavas proovis ületab selle testi läviväärtuse.
Kui analüüsitav proovis puudub, seondub Ab-tag-konjugaat testirea tsoonis immobiliseeritud Ag:kandevalku konjugaadiga. Mittesiduv Ab-tag konjugaat siseneb kontrolljoone tsooni ja seondub seal liigi vastaste antikehadega. Seega on kahe värvilise joone (test ja kontroll) olemasolu negatiivne analüüsitulemus.
Konkurentsiaalset LFT-formaati kasutatakse madala molekulmassiga ühendite, sealhulgas narkootiliste ühendite metaboliitide avastamiseks uriinis, suu kaudu manustatavas vedelikus ja koeekstraktides.
Konkurentsiaalne LFT-meetod, mida kasutatakse madala molekulmassiga ühendite määramiseks, põhineb analüüdi ja immobiliseeritud analüüdi-kandevalkukonjugaadi vahelisel konkurentsil piiratud arvu sidumiskohtade pärast, mis on seotud Ab-tag-konjugaadis sisalduvate spetsiifiliste antikehadega. Kui analüüsitavat ainet sisaldavat proovi manustatakse, seondub see AT-tag-konjugaadiga konjugaatmembraanil. Seejärel läbib immuunkompleks testitsooni, kus analüüdi:kandevalku konjugaat on immobiliseeritud. Immunkompleks ei saa selle konjugaadiga seonduda steroorsete takistuste tõttu: madala molekulmassiga ühenditel on tavaliselt üks antigeenne determinant ja vastavalt sellele on antikehadel üks antigeeni sidumiskoht, mille analüüt juba hõivab. Järgnevalt seovad immuunkompleksi antiliigivastased antikehad kontrolljoonel. Selle tulemusena näitab värvilise riba puudumine testitsoonis ja värvi olemasolu kontrolltsoonis, et analüüdi kontsentratsioon uuritavas proovis ületab selle testi läviväärtuse.
Kui analüüsitav proovis puudub, seondub Ab-tag-konjugaat testirea tsoonis immobiliseeritud Ag:kandevalku konjugaadiga. Mittesiduv Ab-tag konjugaat siseneb kontrolljoone tsooni ja seondub seal liigi vastaste antikehadega. Seega on kahe värvilise joone (test ja kontroll) olemasolu negatiivne analüüsitulemus.
Konkurentsiaalset LFT-formaati kasutatakse madala molekulmassiga ühendite, sealhulgas narkootiliste ühendite metaboliitide avastamiseks uriinis, suu kaudu manustatavas vedelikus ja koeekstraktides.
Lihtsam selgitus.
Kui te ei saa aru, selgitaksin lihtsamalt. Iga testiriba alguses on märgistatud antikehad. Tänu testiriba struktuurile levib uriin mööda seda, kandes tekkinud kompleksid testialasse, kus narkootikumide ja valkude sidemed on fikseeritud. Kuna saabunud immuunkompleksi antikeha on juba uriinist ravimiga vastu võetud, ei saa see testitsoonis kinnituda ja liigub edasi kontrolltsooni, kus ta seondub antiliigivastase antikehaga, värvides skaalal ühe riba (positiivne tulemus).
Kui bioproovis ei ole narkootikumi, liiguvad antikehad uriinis mööda testiriba, jäädes vabaks. Kui antikeha-proteiinikompleks kohtub testpiirkonnas, kinnitub osa märgistatud antikehadest (ilmub esimene triip), ülejäänud liigub uriinivooluga kontrollpiirkonda, kus see samuti seondub liigivastase antikehaga, mis tähistab teist triipu (2 triipu - negatiivne tulemus). Kui joon ilmub testitsooni, kuid ei ilmu kontrolltsooni (peaks alati ilmuma) - test on vigane.
Kui bioproovis ei ole narkootikumi, liiguvad antikehad uriinis mööda testiriba, jäädes vabaks. Kui antikeha-proteiinikompleks kohtub testpiirkonnas, kinnitub osa märgistatud antikehadest (ilmub esimene triip), ülejäänud liigub uriinivooluga kontrollpiirkonda, kus see samuti seondub liigivastase antikehaga, mis tähistab teist triipu (2 triipu - negatiivne tulemus). Kui joon ilmub testitsooni, kuid ei ilmu kontrolltsooni (peaks alati ilmuma) - test on vigane.
Aineid kasutasid vabatahtlikud, kes ei võtnud piisavalt kaua midagi psühhoaktiivset, nende analüüsiks võeti uriini. Siin on katse tulemused.
Katsed.
AMPHETAMINEPeamised metaboliidid: amfetamiin, 4-hüdroksüamfetamiin, 4-hüdroksünorefedriin, 4-hüdroksüfenüülatsetoon, bensoehape, hipuurhape, norefedriin, fenüülatsetoon.
COCAINE.
Peamised metaboliidid: bensoylekgoniin, ekgoniini metüülester, ekgoniin, norkokaiin, p-hüdroksükaiin, m-hüdroksükaiin, p-hüdroksübensoylekgoniin, m-hüdroksübensoylekgoniin.
Kui te vaatate testi paremal pool, siis näete, miks testribasid tuleb käsitleda kriitilise vaatenurgaga. Testitav ei ole hiljuti kasutanud ühtegi PAS-i, välja arvatud kokaiini.
HEROIIN.
Peamised metaboliidid: morfiin, normorfiin, hüdromorfoon.
MDMA / ECSTASY.
Peamised metaboliidid: 3,4-metüleendioksümetamfetamiin (MDMA), 3,4-metüleendioksüamfetamiin (MDA), 4-hüdroksü-3-metoksümetamfetamiin (HMMA), 4-hüdroksü-3-metoksüamfetamiin (HMA).
Saadaval on MDMA / ecstasy testribad, kuid neid on raskem leida. Uriinist leiti amfetamiini ja metamfetamiini. See on seletatav nende ühise kuulumisega samasse klassi ja vastavalt ainete ja nende metaboliitide struktuurilise sarnasusega. THC (kannabinoidid) ja OPI (opiaadid) kaalud teises katses ei osale katses (ei aktiveeru). Vasakpoolse foto kohaselt ei tuvastata neid aineid seoses MDMA kasutamisega.
MEPHEDRONE.
Peamised metaboliidid: mefedroon, nor-mefedroon, 4'-karboksü-mefedroon, 1'-dihüdro-mefedroon, N-suktsinüül-nor-mefedroon.
Huvitav kommentaar saidi https://www.zoomtesting.co.uk toimetajatelt :"Mõned müüjad osutavad, et mefedrooni avastamiseks saab kasutada metamfetamiini testi. See on siiski vale. Metamfetamiini ja mefedrooni keemiline struktuur on erinev, seega metamfetamiini test ei kehti mefedrooni puhul". Noh, kontrollime seda.
Lisaks standardsetele ainetele kasutati veel ühte testiriba barbituraatide testimiseks. Selle testribaga on selgelt midagi valesti. Testi korrati teise vabatahtlikuga, kes ei olnud kunagi kasutanud barbituraate või neid sisaldavaid preparaate, ja tulemus oli sarnane.
ALPHA-PVP (alfa-pürrolidinovalerofenoon).
Teine rida PCP-aknas peaaegu täielikult puudub.
MARIJUANA.
Peamised metaboliidid: tetrahüdrokannabinool (THC), 11-hüdroksü-THC, 11-nor-9-karboksü-THC. Kanepi hästi määratud ja alati ainult oma aknas "THC" (tetrahüdrokannabinool), seda piisab kõige lihtsamal testil näidata.
Järeldus.
Testid on tuvastanud narkootikume kehavedelikes palju kauem, kui selle psühhoaktiivne mõju on tunda. Need on üsna odavad, hea tundlikkusega ja vaid vähesel määral halvemad kui laboris kasutatavad meetodid. Pidage meeles oma ohutust - kui on vaja ise kontrollida oma "puhtust", on ekspresstestid hädavajalikud.
Last edited by a moderator: