Εισαγωγή.
Ο κύριος στόχος αυτής της έρευνας είναι η αξιολόγηση της δυνατότητας προσδιορισμού των κύριων φαρμάκων σε βιολογικά υγρά με δημόσια διαθέσιμες μεθόδους έκφρασης στο σπίτι. Το παρόν άρθρο απαντά στα ακόλουθα ερωτήματα.
- Αποκαλύπτουν οι δοκιμές φαρμακείου για 3-20 δολάρια πραγματικά το γεγονός της χρήσης των δηλωθέντων ουσιών; (Οι κλασικές συνδυασμένες δοκιμαστικές ταινίες περιέχουν κλίμακες για τον προσδιορισμό της αμφεταμίνης, της μεθαμφεταμίνης, της κοκαΐνης, της μαριχουάνας, των οπιούχων).
- Θα μπορούσαν αυτές οι ταινίες τεστ να είναι χρήσιμες για το Alpha-PVP και τη Μεφεδρόνη; (Δεν υπάρχουν εξειδικευμένα τεστ στα φαρμακεία)
Ο λόγος της χρήσης του πιο κοινού τεστ φαρμακείου, το οποίο αγοράζεται εύκολα, είναι ότι η έρευνα θα πρέπει να είναι χρήσιμη και να έχει πρακτική εφαρμογή.
Σημαντικό: θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν και άλλα κιτ δοκιμών πλευρικής ροής (LFTs) με διαφορετικές ετικέτες, η εταιρεία κατασκευής δεν έχει σημασία, διότι κάθε κιτ δοκιμών έχει τον ίδιο μηχανισμό λειτουργίας και συγκρίσιμη αποτελεσματικότητα.
Σχετικά με τις LFT.
Οι δοκιμασίες πλευρικής ροής (LFTs), επίσης γνωστές ως ανοσοχρωματογραφικές δοκιμασίες πλευρικής ροής ή ταχείες δοκιμασίες, είναι απλές συσκευές που προορίζονται για την ανίχνευση της παρουσίας μιας ουσίας-στόχου σε ένα υγρό δείγμα χωρίς την ανάγκη εξειδικευμένου και δαπανηρού εξοπλισμού. Οι εν λόγω εξετάσεις χρησιμοποιούνται ευρέως στην ιατρική διάγνωση για κατ' οίκον εξετάσεις, εξετάσεις στο σημείο περίθαλψης ή εργαστηριακή χρήση. Για παράδειγμα, το οικιακό τεστ εγκυμοσύνης είναι μια LFT που ανιχνεύει μια συγκεκριμένη ορμόνη. Οι εξετάσεις αυτές είναι απλές, οικονομικές και γενικά εμφανίζουν αποτελέσματα σε περίπου πέντε έως 30 λεπτά. Πολλές εργαστηριακές εφαρμογές αυξάνουν την ευαισθησία των απλών LFT με τη χρήση πρόσθετου ειδικού εξοπλισμού.
Οι LFTs λειτουργούν με τις ίδιες αρχές με τις ενζυμικά συνδεδεμένες ανοσοπροσροφητικές δοκιμασίες (ELISA). Στην ουσία, οι εξετάσεις αυτές τρέχουν το υγρό δείγμα κατά μήκος της επιφάνειας ενός μαξιλαριού με αντιδραστικά μόρια που εμφανίζουν οπτικά θετικό ή αρνητικό αποτέλεσμα. Τα μαξιλάρια βασίζονται σε μια σειρά τριχοειδών στρωμάτων, όπως κομμάτια πορώδους χαρτιού, μικροδομημένου πολυμερούς ή πυροσυσσωματωμένου πολυμερούς. Κάθε ένα από αυτά τα μαξιλάρια έχει την ικανότητα να μεταφέρει αυθόρμητα υγρό (π.χ. ούρα, αίμα, σάλιο).
Το μαξιλάρι δείγματος λειτουργεί ως σφουγγάρι και συγκρατεί περίσσεια υγρού δείγματος. Μόλις εμποτιστεί, το υγρό ρέει στο δεύτερο μαξιλάρι συζεύξεων, στο οποίο ο κατασκευαστής έχει αποθηκεύσει κατεψυγμένα αποξηραμένα βιοδραστικά σωματίδια που ονομάζονται συζεύξεις (βλέπε παρακάτω) σε μια μήτρα αλατιού-ζάχαρης. Το μαξιλάρι συζεύγματος περιέχει όλα τα αντιδραστήρια που απαιτούνται για μια βελτιστοποιημένη χημική αντίδραση μεταξύ του μορίου-στόχου (π.χ. ενός αντιγόνου) και του χημικού του εταίρου (π.χ. ενός αντισώματος) που έχει ακινητοποιηθεί στην επιφάνεια του σωματιδίου. Τα σημάδια αυτά σημαδεύουν τα σωματίδια-στόχους καθώς περνούν μέσα από το μαξιλάρι και συνεχίζουν προς τις γραμμές δοκιμής και ελέγχου. Η γραμμή δοκιμής εμφανίζει ένα σήμα, συχνά ένα χρώμα, όπως στα τεστ εγκυμοσύνης. Η γραμμή ελέγχου περιέχει συνδέσμους συγγένειας που δείχνουν αν το δείγμα έχει περάσει και τα βιομόρια στο συζευγμένο μαξιλάρι είναι ενεργά. Αφού περάσει από αυτές τις ζώνες αντίδρασης, το υγρό εισέρχεται στο τελικό πορώδες υλικό, το φυτίλι, το οποίο λειτουργεί απλώς ως δοχείο αποβλήτων.
Οι LFTs λειτουργούν με τις ίδιες αρχές με τις ενζυμικά συνδεδεμένες ανοσοπροσροφητικές δοκιμασίες (ELISA). Στην ουσία, οι εξετάσεις αυτές τρέχουν το υγρό δείγμα κατά μήκος της επιφάνειας ενός μαξιλαριού με αντιδραστικά μόρια που εμφανίζουν οπτικά θετικό ή αρνητικό αποτέλεσμα. Τα μαξιλάρια βασίζονται σε μια σειρά τριχοειδών στρωμάτων, όπως κομμάτια πορώδους χαρτιού, μικροδομημένου πολυμερούς ή πυροσυσσωματωμένου πολυμερούς. Κάθε ένα από αυτά τα μαξιλάρια έχει την ικανότητα να μεταφέρει αυθόρμητα υγρό (π.χ. ούρα, αίμα, σάλιο).
Το μαξιλάρι δείγματος λειτουργεί ως σφουγγάρι και συγκρατεί περίσσεια υγρού δείγματος. Μόλις εμποτιστεί, το υγρό ρέει στο δεύτερο μαξιλάρι συζεύξεων, στο οποίο ο κατασκευαστής έχει αποθηκεύσει κατεψυγμένα αποξηραμένα βιοδραστικά σωματίδια που ονομάζονται συζεύξεις (βλέπε παρακάτω) σε μια μήτρα αλατιού-ζάχαρης. Το μαξιλάρι συζεύγματος περιέχει όλα τα αντιδραστήρια που απαιτούνται για μια βελτιστοποιημένη χημική αντίδραση μεταξύ του μορίου-στόχου (π.χ. ενός αντιγόνου) και του χημικού του εταίρου (π.χ. ενός αντισώματος) που έχει ακινητοποιηθεί στην επιφάνεια του σωματιδίου. Τα σημάδια αυτά σημαδεύουν τα σωματίδια-στόχους καθώς περνούν μέσα από το μαξιλάρι και συνεχίζουν προς τις γραμμές δοκιμής και ελέγχου. Η γραμμή δοκιμής εμφανίζει ένα σήμα, συχνά ένα χρώμα, όπως στα τεστ εγκυμοσύνης. Η γραμμή ελέγχου περιέχει συνδέσμους συγγένειας που δείχνουν αν το δείγμα έχει περάσει και τα βιομόρια στο συζευγμένο μαξιλάρι είναι ενεργά. Αφού περάσει από αυτές τις ζώνες αντίδρασης, το υγρό εισέρχεται στο τελικό πορώδες υλικό, το φυτίλι, το οποίο λειτουργεί απλώς ως δοχείο αποβλήτων.
Υπάρχουν δύο τύποι LFT: η άμεση και η ανταγωνιστική μέθοδος.
Ο άμεσος LFT (σάντουιτς) χρησιμοποιεί ένα σύζευγμα αντισώματος-σήμου που επικάθεται σε μια συζευγμένη μεμβράνη. Ειδικά για τον συγκεκριμένο αναλύτη, τα αντισώματα ακινητοποιούνται στη γραμμή δοκιμής και τα αντισώματα κατά των ειδών που είναι ειδικά για τα πρωτογενή αντισώματα ακινητοποιούνται στη γραμμή ελέγχου. Όταν το δείγμα, το οποίο περιέχει μια αναλυόμενη ουσία, εφαρμόζεται στη λωρίδα δοκιμής και το δείγμα αυτό προσκρούει στη μεμβράνη με το συζυγές, ο αναλύτης δεσμεύεται στο συζυγές AT-tag. Στη συνέχεια, το ανοσοσυμπλέγμα εισέρχεται στη ζώνη εξέτασης, όπου συνδέεται με ειδικά αντισώματα, σχηματίζοντας ένα "σάντουιτς" Ab-Ag-Ab-tag. Η περίσσεια του μη δεσμευμένου συζεύγματος δεσμεύεται σε αντισώματα κατά του είδους στη γραμμή ελέγχου. Επομένως, 2 γραμμές στην ταινία ελέγχου αποτελούν θετικό αποτέλεσμα της εξέτασης. Εάνδεν υπάρχει αναλυόμενη ουσία στο δείγμα, το σύζευγμα συνδέεται με αντισώματα κατά του είδους μόνο στη γραμμή ελέγχου, σχηματίζοντας μία γραμμή στην ταινία εξέτασης. Η άμεση μέθοδος LFT χρησιμοποιείται για την ανίχνευση ενώσεων υψηλού μοριακού βάρους - ιών, συμπεριλαμβανομένου του HIV- διαφόρων ορμονών (για παράδειγμα, σε τεστ εγκυμοσύνης), παθογόνων λοιμωδών νοσημάτων.
Η ανταγωνιστική μέθοδοςLFT που χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό ενώσεων χαμηλού μοριακού βάρους βασίζεται στον ανταγωνισμό μεταξύ του αναλύτη και του ακινητοποιημένου συζεύγματος αναλύτη:πρωτεΐνη-φορέας για έναν περιορισμένο αριθμό θέσεων πρόσδεσης για ειδικά αντισώματα που περιέχονται στο συζεύγμα Ab-tag. Όταν εφαρμόζεται ένα δείγμα που περιέχει τον αναλύτη, αυτός προσδένεται στο σύζευγμα ΑΤ- ετικέτας στη μεμβράνη σύζευξης. Στη συνέχεια, το ανοσοσυμπλέγμα διέρχεται από τη ζώνη δοκιμής, όπου ακινητοποιείται η σύζευξη αναλυτή:πρωτεΐνη-φορέας. Το ανοσοσύμπλεγμα δεν μπορεί να συνδεθεί με αυτό το σύζευγμα λόγω στερικών εμποδίων: οι ενώσεις χαμηλού μοριακού βάρους έχουν συνήθως έναν αντιγονικό καθοριστή και, κατά συνέπεια, τα αντισώματα έχουν μία θέση πρόσδεσης αντιγόνου, η οποία είναι ήδη κατειλημμένη από τον αναλύτη. Στη συνέχεια, το ανοσοποιητικό σύμπλοκο δεσμεύεται από αντισώματα κατά του είδους στη γραμμή ελέγχου. Ως αποτέλεσμα, η απουσία έγχρωμης ζώνης στη ζώνη δοκιμής και η παρουσία χρώματος στη ζώνη ελέγχου υποδεικνύει ότι η συγκέντρωση του αναλύτη στο δείγμα δοκιμής υπερβαίνει την τιμή κατωφλίου της για τη συγκεκριμένη δοκιμή.
Εάν δεν υπάρχει αναλυτής στο δείγμα, η σύζευξη Ab-tag συνδέεται με την σύζευξη Ag:πρωτεΐνη-φορέας που είναι ακινητοποιημένη στη ζώνη της γραμμής δοκιμής. Το μη δεσμευμένο σύζευγμα Ab-tag εισέρχεται στη ζώνη της γραμμής ελέγχου και δεσμεύεται εκεί με αντισώματα κατά των ειδών. Έτσι, η παρουσία δύο χρωματισμένων γραμμών (δοκιμής και ελέγχου) αποτελεί αρνητικό αποτέλεσμα ανάλυσης.
Η ανταγωνιστική μορφή LFT χρησιμοποιείται για την ανίχνευση ενώσεων χαμηλού μοριακού βάρους, συμπεριλαμβανομένων μεταβολιτών ναρκωτικών ενώσεων σε ούρα, στοματικό υγρό και εκχυλίσματα ιστών.
Η ανταγωνιστική μέθοδοςLFT που χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό ενώσεων χαμηλού μοριακού βάρους βασίζεται στον ανταγωνισμό μεταξύ του αναλύτη και του ακινητοποιημένου συζεύγματος αναλύτη:πρωτεΐνη-φορέας για έναν περιορισμένο αριθμό θέσεων πρόσδεσης για ειδικά αντισώματα που περιέχονται στο συζεύγμα Ab-tag. Όταν εφαρμόζεται ένα δείγμα που περιέχει τον αναλύτη, αυτός προσδένεται στο σύζευγμα ΑΤ- ετικέτας στη μεμβράνη σύζευξης. Στη συνέχεια, το ανοσοσυμπλέγμα διέρχεται από τη ζώνη δοκιμής, όπου ακινητοποιείται η σύζευξη αναλυτή:πρωτεΐνη-φορέας. Το ανοσοσύμπλεγμα δεν μπορεί να συνδεθεί με αυτό το σύζευγμα λόγω στερικών εμποδίων: οι ενώσεις χαμηλού μοριακού βάρους έχουν συνήθως έναν αντιγονικό καθοριστή και, κατά συνέπεια, τα αντισώματα έχουν μία θέση πρόσδεσης αντιγόνου, η οποία είναι ήδη κατειλημμένη από τον αναλύτη. Στη συνέχεια, το ανοσοποιητικό σύμπλοκο δεσμεύεται από αντισώματα κατά του είδους στη γραμμή ελέγχου. Ως αποτέλεσμα, η απουσία έγχρωμης ζώνης στη ζώνη δοκιμής και η παρουσία χρώματος στη ζώνη ελέγχου υποδεικνύει ότι η συγκέντρωση του αναλύτη στο δείγμα δοκιμής υπερβαίνει την τιμή κατωφλίου της για τη συγκεκριμένη δοκιμή.
Εάν δεν υπάρχει αναλυτής στο δείγμα, η σύζευξη Ab-tag συνδέεται με την σύζευξη Ag:πρωτεΐνη-φορέας που είναι ακινητοποιημένη στη ζώνη της γραμμής δοκιμής. Το μη δεσμευμένο σύζευγμα Ab-tag εισέρχεται στη ζώνη της γραμμής ελέγχου και δεσμεύεται εκεί με αντισώματα κατά των ειδών. Έτσι, η παρουσία δύο χρωματισμένων γραμμών (δοκιμής και ελέγχου) αποτελεί αρνητικό αποτέλεσμα ανάλυσης.
Η ανταγωνιστική μορφή LFT χρησιμοποιείται για την ανίχνευση ενώσεων χαμηλού μοριακού βάρους, συμπεριλαμβανομένων μεταβολιτών ναρκωτικών ενώσεων σε ούρα, στοματικό υγρό και εκχυλίσματα ιστών.
Απλούστερη εξήγηση.
Αν δεν καταλαβαίνετε, θα σας εξηγήσω με απλούστερο τρόπο. Υπάρχουν επισημασμένα αντισώματα στην αρχή κάθε ταινίας εξέτασης. Λόγω της δομής της ταινίας εξέτασης, τα ούρα απλώνονται κατά μήκος της, μεταφέροντας τα προκύπτοντα σύμπλοκα στην περιοχή εξέτασης, όπου στερεώνονται οι σύνδεσμοι φαρμάκου-πρωτεΐνης. Δεδομένου ότι το αντίσωμα από το ανοσοποιητικό σύμπλοκο που έφτασε έχει ήδη προσληφθεί από το φάρμακο από τα ούρα, δεν μπορεί να προσκολληθεί στη ζώνη εξέτασης και μετακινείται περαιτέρω προς τη ζώνη ελέγχου, όπου συνδέεται με το αντίσωμα κατά του είδους, χρωματίζοντας μία λωρίδα στην κλίμακα (θετικό αποτέλεσμα).
Εάν δεν υπάρχει φάρμακο στο βιολογικό δείγμα, τα αντισώματα μετακινούνται στα ούρα κατά μήκος της ταινίας ελέγχου, παραμένοντας ελεύθερα. Όταν το σύμπλοκο αντισώματος-πρωτεΐνης συναντηθεί στην περιοχή ελέγχου, κάποια επισημασμένα αντισώματα προσκολλώνται σε αυτό (εμφανίζεται η πρώτη λωρίδα), τα υπόλοιπα μετακινούνται με τη ροή των ούρων στην περιοχή ελέγχου, όπου επίσης προσκολλώνται στο αντίσωμα κατά του είδους, επισημαίνοντας τη δεύτερη λωρίδα (2 λωρίδες - αρνητικό αποτέλεσμα). Εάν η γραμμή εμφανιστεί στη ζώνη δοκιμής αλλά δεν εμφανιστεί στη ζώνη ελέγχου (πρέπει να εμφανίζεται πάντα) - η εξέταση είναι ελαττωματική.
Εάν δεν υπάρχει φάρμακο στο βιολογικό δείγμα, τα αντισώματα μετακινούνται στα ούρα κατά μήκος της ταινίας ελέγχου, παραμένοντας ελεύθερα. Όταν το σύμπλοκο αντισώματος-πρωτεΐνης συναντηθεί στην περιοχή ελέγχου, κάποια επισημασμένα αντισώματα προσκολλώνται σε αυτό (εμφανίζεται η πρώτη λωρίδα), τα υπόλοιπα μετακινούνται με τη ροή των ούρων στην περιοχή ελέγχου, όπου επίσης προσκολλώνται στο αντίσωμα κατά του είδους, επισημαίνοντας τη δεύτερη λωρίδα (2 λωρίδες - αρνητικό αποτέλεσμα). Εάν η γραμμή εμφανιστεί στη ζώνη δοκιμής αλλά δεν εμφανιστεί στη ζώνη ελέγχου (πρέπει να εμφανίζεται πάντα) - η εξέταση είναι ελαττωματική.
Οι ουσίες χρησιμοποιήθηκαν από εθελοντές που δεν έλαβαν τίποτα ψυχοδραστικό για επαρκές χρονικό διάστημα, για την ανάλυσή τους ελήφθησαν ούρα. Ακολουθούν τα αποτελέσματα του πειράματος.
Πειράματα.
ΑΜΦΕΤΑΜΙΝΗΚύριοι μεταβολίτες: αμφεταμίνη, 4-υδροξυαμφεταμίνη, 4-υδροξυνορεφεδρίνη, 4-υδροξυφαινυλακετόνη, βενζοϊκό οξύ, ιππουρικό οξύ, νορεφεδρίνη, φαινυλακετόνη.
COCAINE.
Κύριοι μεταβολίτες: βενζοϋλεκογονίνη, μεθυλεστέρας εκγονίνης, εκγονίνη, νορκοκαΐνη, p-υδροξυκαΐνη, m-υδροξυκαΐνη, p-υδροξυβενζοϋλεκογονίνη, m-υδροξυβενζοϋλεκογονίνη.
Εάν κοιτάξετε το τεστ στα δεξιά, μπορείτε να δείτε γιατί οι ταινίες ελέγχου πρέπει να αντιμετωπίζονται με κριτική άποψη. Το εξεταζόμενο άτομο δεν έχει κάνει πρόσφατα χρήση PAS, εκτός από κοκαΐνη.
ΗΡΟΙΝΗ.
Κύριοι μεταβολίτες: μορφίνη, νορμορφίνη, υδρομορφόνη.
MDMA / ΈΚΣΤΑΣΗ.
Κύριοι μεταβολίτες: 3,4-μεθυλενοδιοξυμεθαμφεταμίνη (MDMA), 3,4-μεθυλενοδιοξυαμφεταμίνη (MDA), 4-υδροξυ-3-μεθοξυμεθαμφεταμίνη (HMMA), 4-υδροξυ-3-μεθοξυαμφεταμίνη (HMA).
Υπάρχουν διαθέσιμες δοκιμαστικές ταινίες MDMA / έκστασης, αλλά είναι πιο δύσκολο να βρεθούν. Η αμφεταμίνη και η μεθαμφεταμίνη βρέθηκαν στα ούρα. Αυτό εξηγείται από την κοινή υπαγωγή τους στην ίδια κατηγορία και, κατά συνέπεια, από τη δομική ομοιότητα των ουσιών και των μεταβολιτών τους. Οι κλίμακες THC (κανναβινοειδή) και OPI (οπιούχα) στη δεύτερη δοκιμή δεν συμμετέχουν στο πείραμα (δεν ενεργοποιούνται). Σύμφωνα με την αριστερή φωτογραφία, οι ουσίες αυτές δεν ανιχνεύονται σε σχέση με τη χρήση MDMA.
ΜΕΦΕΔΡΟΝΗ.
Κύριοι μεταβολίτες: μεφεδρόνη, νορ-μεφεδρόνη, 4'-καρβοξυ-μεφεδρόνη, 1'-διυδρο-μεφεδρόνη, Ν-σουκκινυλ-νορ-μεφεδρόνη.
Ένα ενδιαφέρον σχόλιο από τους συντάκτες του ιστότοπου https://www.zoomtesting.co.uk:"Ορισμένοι πωλητές επισημαίνουν ότι ένα τεστ μεθαμφεταμίνης μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανίχνευση της μεφεδρόνης. Ωστόσο, αυτό είναι εσφαλμένο. Η χημική δομή της μεθαμφεταμίνης και της μεφεδρόνης είναι διαφορετική, οπότε το τεστ μεθαμφεταμίνης δεν θα είναι έγκυρο για τη μεφεδρόνη". Λοιπόν, ας το ελέγξουμε.
Εκτός από τις τυποποιημένες ουσίες, χρησιμοποιήθηκε άλλη μία δοκιμαστική ταινία για τον έλεγχο των βαρβιτουρικών. Είναι σαφές ότι κάτι δεν πάει καλά με αυτή τη δοκιμαστική λωρίδα. Το τεστ επαναλήφθηκε από άλλον εθελοντή που δεν είχε χρησιμοποιήσει ποτέ βαρβιτουρικά ή σκευάσματα που τα περιείχαν, με παρόμοιο αποτέλεσμα.
ALPHA-PVP (α-πυρρολιδινοβαλεροφαινόνη).
Η δεύτερη γραμμή στο παράθυρο PCP απουσιάζει σχεδόν εντελώς.
MARIJUANA.
Κύριοι μεταβολίτες: τετραϋδροκανναβινόλη (THC), 11-υδροξυ-THC, 11-nor-9-carboxy-THC. Η κάνναβη προσδιορίζεται καλά και πάντα μόνο στο παράθυρό της "THC" (τετραϋδροκανναβινόλη), αρκεί να αποδειχθεί στο πιο απλό τεστ.
Συμπέρασμα.
Τα τεστ ανιχνεύουν ναρκωτικά στα σωματικά υγρά για πολύ μεγαλύτερο χρονικό διάστημα από ό,τι γίνεται αισθητή η ψυχοδραστική τους δράση. Είναι αρκετά φτηνές, έχουν καλή ευαισθησία και υπολείπονται ελάχιστα των μεθόδων που χρησιμοποιούνται στο εργαστήριο. Να θυμάστε την ασφάλειά σας - αν υπάρχει ανάγκη να ελέγξετε εσείς οι ίδιοι την "καθαριότητά" σας, τα τεστ express θα είναι απαραίτητα.
Last edited by a moderator: