GC-MS методи за лекарства

[G.Patton]

Въведение: В книгата са представени всички видове химични вещества, които се използват в химията:

Имам богат опит в определянето на качеството на лекарствата чрез хроматография-масова спектрометрия. Реших да напиша тази инструкция за химици, които искат да започнат да изследват лекарства с помощта на GC-MS оборудване.
Въпреки широкия спектър от възможности на хромато-масспектрометрията съществуват ограничения на възможностите. Масовият детектор в тандем с хроматографа не може да определя неорганични вещества, органични вещества с молекулно тегло над 450 Da или органични вещества с висока температура на кипене (>350 ◦С).

Характеристики на оборудването:

Най-напред трябва да определите възможностите си за извършване на анализ с помощта на вашия газов хроматограф. За тези цели могат да се използват най-популярните подходящи GC-MS системи като газов хроматограф Agilent 7890, свързан с квадруполен масов детектор Agilent 5975C, или Thermo Scientific ISQ 7000 Single Quadrupole GC-MS. Основната характеристика, която трябва да знаете - това е полярността на капилярната колона. За по-голямата част от лекарствата ви е необходима неполярна или слабополярна капилярна колона. Например HP-1/DB-1 или HP-5/DB-5 са най-добрият избор за широк спектър от приложения. Също така трябва да знаете диапазона на масите, които вашият масдетектор може да открие в режим SCAN. Обикновено ви е необходим диапазон 30-450 m/z, който е достатъчен за определяне на всички видове лекарства. Повечето от тях могат да бъдат установени в интервала 30-350 m/z.

Процедура за подготовка на пробата:

Всички лекарства остават под формата на соли поради по-високата си стабилност, която позволява дългото им съхранение без структурни промени. Например амфетаминът има азотен атом, той е основа, която е свързана с киселинен(и) йон(и) като 2-(SO4), -Cl, 3-(PO4). Трябва да получите свободната база на анализираното вещество. Също така, ако не знаете какво вещество имате за анализ, трябва да проведете експеримент за качествено определяне, като използвате реактивите, които споменах по-рано(Реактиви за изследване на наркотици).

Универсалното приготвяне ще бъде доста просто. Поставете аликвотна част от пробата в колба и я напълнете с чист разтворител (CCl4/ CH2Cl2). Пригответе приблизително 10-1000 mkg/ml от разтвора. Повечето наркотични вещества не могат да бъдат разтворени във въглероден тетрахлорид/дихлорметан. След това трябва да добавите 1-2 обема 30-40% воден разтвор на NaOH/KOH в тази колба с разтвора на наркотика и да го разбъркате добре.

Почти същият начин на приготвяне се използва за марките(LSD, NBOMe, NBOH и др. ). Вземете марка с обявеното количество вещество и я изрежете в колбата, добавете чист разтворител (препоръчва се CH2Cl2). Пригответе приблизително 10-1000 mkg/ml от разтвора. След това трябва да добавите 1-2 обема 30-40% воден разтвор на NaOH/KOH в тази колба с разтвора на лекарството и да го разбъркате добре.

Ще получите свободна основа на анализираното лекарство, която ще мигрира към слоя с органичен разтворител. Трябва да инжектирате 1 mkl разтвор на лекарството и да започнете анализа.

GC-MS методи.
За широк спектър от лекарства:

Системата GC-MS работи при 70 eV в режим на електронна йонизация. Апаратът е оборудван с капилярна колона от 5% фенил-метилсиликон (30 m × 0,25 mm i.d., 0,25 m дебелина на филма). Хелият се използва като носещ газ с постоянен поток от 1 ml/min. Хроматографските условия са определени, както следва: Температурата в пещта се задържа на 130 ◦С за 2 min, повишава се до 270 ◦С при 15 ◦С/min. Портът за впръскване се настройва на 270 ◦C в режим на разделяне с разделяне на райтовете 25:1. Масовият детектор работи в режим на сканиране (диапазон на сканиране от m/z 30-390).

За LSD, NBOMe, NBOH марки:

GC-MS системата работи при 70 eV в режим на електронна йонизация. Апаратът е оборудван с капилярна колона от 5% фенил-метилсиликон (30 m × 0,25 mm i.d., 0,25 m дебелина на филма). Хелият се използва като носещ газ с постоянен поток от 1 ml/min. Хроматографските условия се определят, както следва: Температурата в пещта се задържа при 40 ◦С за 2 min, повишава се до 210 ◦С при 15 ◦С/min, след което се повишава до 280 ◦С при 5 ◦С/min и се задържа 20 min. Портът за впръскване се настройва на 280 ◦C в режим без разделяне. Масовият детектор работеше в режим на сканиране (диапазон на сканиране от m/z 30-450).

Заключение:
Както можете да видите, подготовката на пробите е доста проста. То не се нуждае от скъпи реактиви или трудни манипулации. Тази процедура обаче е много важна за получаване на подходящи резултати от анализа.

 

[Cocojamba]

Какво ще кажете за други системи за GC-MS? Или тези методи работят само с Agilent или Thermo Scientific?

 

[G.Patton]

Всъщност не, можете да използвате всяка система със същите спецификации.